求助：流式细胞术鉴定脐带间充质干细胞

winnebenben

我们实验室现在正在做脐带间充质干细胞的组织块培养法，等细胞长出来后需要用到流式来鉴定细胞，但是现在可供选择的抗体很多，看了一些文献上面的抗体组合也都不太相同，因资金有限，不可能把所有抗体都买来做，现在初步定下用CD29、44、105和CD45这四种抗体，但是不知道是否可行，还有我看很多人都用了CD34，想问这个抗体是必须要做吗？如果要鉴定脐带间充质干细胞必须要做的抗体有哪些呢？求解答~！我是新手，还不太了解，如果问题太初级大家不要见笑噢~谢谢！

不再颓废

根据国际细胞疗法协会的标准，人类MSCs在标准培养条件下必须满足以下条件：（1）此类细胞必须贴壁生长；（2）必须表达CD105、CD73、CD905 i  ~0 o% s- r( Z7 t
分子，不表达CD45、CD34、CD14、CD11b、CD79和表面分子HLA- DR；（3）此类细胞必须能够分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。

流泪的鱼

特异性抗体流式细胞仪检测：CD29、CD73、CD90、CD105阳性率大于95%， CD11a、CD19、CD34、CD45阴性率大于95%。成脂实验，成骨细胞实验阳性！
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winnebenben

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学习了~谢谢！

winnebenben

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三月桂花香

一般最少做阳性表达的：CD105/73/90，105和90基本可以在95%以上，73就不太好说，但是要求到85左右吧,阴性的有CD3445基本低于2%。试剂可以选择BD，价格是高了点~~

mjc588

国产FITC直标抗体还是可以的，我们就是买的国产的，CD73结果也很好。其实做一下多项分化是重要的。

孙帅帅

一般认为体外培养的MSC细胞体积小、呈锁形、核浆比大，不表达分化相关的细胞标志，如Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ形胶原，也不表达造血干细胞系的表面标志，如脂多糖受体CD14、CD34以及白细胞表面抗原CD45等，但是表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和多种表面蛋白