hES传代的问题（维持培养）

郁金凤

hES传代时大家都把ES克隆分成多大的细胞团进行传代啊？分成多大的细胞团进行传代时可以减少ES的分化，ES还长得比较好？

yinjian1104

用EDTA也可以消化成单个细胞

Jonathan

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( _5 L3 [3 O4 Z, u2 I基本不计数。如果计数的话确实不好办。不过现在一直用无feeder的方法，所以也不存在这个问题了

青鸟

回复 Jonathan 的帖子0 e* y( I8 A2 m+ u

( T6 z, H: H- }. o, ?你消化之后不用计数吗？如果计数的话，怎么办呢？# C% a2 y* e* v* W7 a& d1 I' J

Jonathan

回复 青鸟 的帖子# }/ e( D8 B: S$ R  W( L

/ f) }; m, O* B9 K% L饲养层细胞是不会长的。小鼠的ES就是这样，连同feeder一起消化然后种盘。啥问题都没有的

青鸟

回复 Jonathan 的帖子) q/ I' y4 d2 t# S) I

! p" c& z. ^) Q' K- o6 S& b5 v我是种在饲养层上的，你的意思连饲养层一起消化？

Jonathan

回复 青鸟 的帖子& E* K; B- \, S5 ?3 I

: v' Z7 y) I5 v9 w3 y9 F4 E% ~不明白你为什么要将克隆切下。

Jonathan

回复 青鸟 的帖子. P8 o8 f# O/ a- t; o: J9 P8 O
8 g9 c9 h! h" Y7 l9 x
不明白你为什么要将克隆切下。

青鸟

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; o; c3 t* M! j0 x& u) g; Y
/ M1 m1 Q5 |6 X! x- U7 Q机械法将克隆切下，ACCTUSE消化10分钟，离心5分钟，培养基吹匀后种到饲养层上，然后每天观察，隔天换液

Jonathan

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! P* E, e) T  h: X
0 ~0 \0 d- f- _/ X* b具体说说你怎么传的吧