骨髓间充质干细胞自发成骨分化问题

light_blue

全骨髓贴壁法提取的BMSC，本来想做成骨诱导的，结果发现3代细胞普通F12培养液培养就有钙结节，6孔板每孔5万细胞数接种，6天就有很多钙结节。请问各位老师战友们有遇到相同的情况吗？怎么解释呢。还做了茜素红染色与骨钙素的荧光染色，都有很强的的阳性反应
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light_blue

回复 mjc588 的帖子7 q2 K2 s, b, Z1 e9 k: X! S
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条件血清都一样，因为是一起养的，我感觉还是鼠种的问题。

mjc588

回复 light_blue 的帖子9 V& y, u: e/ q/ B) J, R
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那就回想一下，在提两种BMSCs的时候，各种条件是否都一致，如果各种条件操作都一致那会不会是小鼠本身状态的问题？

light_blue

回复 mjc588 的帖子4 Y9 B1 B0 q. t2 M& a
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使用的是5周龄左右的鼠，我做的大鼠的BMSC传代一直很好，小鼠的养到3代不行了。

mjc588

我之前也做过骨分化，但是和LZ这个不一样，LZ可以和文献中的图片比较一下。第一幅图片，我也觉得是细胞老化产生的团块，不知道LZ提原代细胞时是否用的幼鼠bone，根据我自己的经验，成年鼠提的BMSC只能养到P3。

light_blue

回复 xulingous 的帖子9 Q( ^0 Y( C) ]0 O+ G& e5 F
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以前做的21天诱导，gibco成骨诱导试剂盒。

xulingous

回复 askage 的帖子
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有道理·

xulingous

回复 light_blue 的帖子
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请问这个是成骨诱导多少天的？诱导体系是什么？谢谢啊~~~

xulingous

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0 K& d7 v* Y+ P原来这是钙结节啊 没有茜素红染色的时候好像就一团团的 我之前以为是细胞比较密所以扎到一堆死了。。。。

light_blue

回复 askage 的帖子9 X; Y! P% K5 e! A# l  I
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既然能自发成骨分化，地塞米松诱导也没有必要了吧，我做的诱导组成骨效果还没对照组好..