3T3-L细胞总是诱导不成功，怎么回事

tewank1234

3T3-L细胞总是诱导不成功，怎么回事？？、？

tigerzy

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8 L- f5 Y" ]7 J) ~# K你是做什么诱导？胰岛素诱导成脂肪细胞吗？建议第一选择代次较低的细胞，且等到细胞全部长满再进行诱导，第二延长诱导时间，换液后扔保持一段时间的胰岛素含量，然后再换成正常培养基继续培养大概10天左右

fduhoward

用的什么诱导方案，目前最经典的是FBS加上MDI的诱导方案，也有小部分人在MDI基础上加吲哚美辛，具体剂量参考文献报道。
# f# X, h2 J3 d% S6 `% p# O/ }* c另外，3T3-L1 选择4-5代细胞诱导，铺板一定要均匀，一定要在细胞长满接触抑制后再继续培养2-3天后，彻底去除之前的小牛血清培养基，用10%FBS+MDI来诱导，两天后换成10%FBS+胰岛素，再两天后用FBS来养，7-8天后用油红染；5 m# S, W. o$ j
检测的时候别只用油红来判断，镜下脂滴、PPARg、422aP2的蛋白表达，都有参考意义；