feeder飘起可能的原因有哪些呢？

w343989328

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/ }0 P% G- i/ N5 N* X9 e大家好，请问下，培养干细胞时，feeder飘起来会有什么原因呢？？
6 N' m" V/ }; U7 n- y

2013-11-19 17:16 上传

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, Y& ~4 H5 m) f- l( r) e  K* I! N首先这些不是胚胎干细胞，一直看到一些黑点，细胞状态并不是很好，支原体检测阴性。每24h换液。
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9 k$ f. k; J8 `% `" @# f3 ]
突然，一夜之间，细胞就变成这样了。
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2013-11-19 17:16 上传

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吸走上面飘起了的。变成这样。feeder状态很奇怪。- H- S% u- O/ b3 T

2013-11-19 17:16 上传

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回复 w343989328 的帖子
' Z. k. T5 W8 `$ ?& r% ^' i6 K- A  k1 J( G, L$ F7 f
之前也遇到过feeder细胞大片的脱落，可能考虑以下情况：1.培养基问题，2.丝裂霉素，3.feeder细胞本身存在问题。

flagarmy

黑点是污染了 可能是制作饲养层时出的问题 黑点不仅会影响feeder的状态，还会嵌在干细胞之间，干细胞长不好 重新做饲养层吧! M7 C, q9 M* ?- }5 }

w343989328

回复 flagarmy 的帖子
" _7 S# b5 m; {8 P+ ~; @/ \9 j# W: @3 t- O  d' {+ b' B
想请教下黑点是什么污染呢？不会是传说中的黑胶虫吧？！

realyy10

怎么感觉像是有药物筛选的效果。。

flagarmy

回复 w343989328 的帖子5 P, P/ B0 c' Y+ \' Q, c

8 S! I2 [8 R. {! V2 `放任其生长 是不是长成长条状的  会蠕动的黑条？
5 B* |: ^1 s2 Z% e5 S& v

流霞淌

这种状态的饲养层太不行啦！重新制，提取的时候避免污染

nichifanlema2

回复 w343989328 的帖子
6 f9 I5 V6 Z! ~% K( ?! }
' }( s$ F/ e$ ~feeder漂起来的原因很可能是污染了。特别是第二张图，大肠杆菌等细菌污染可能会造成这个样子。放大倍数观察会发现有很多游动的东西。

w343989328

回复 nichifanlema2 的帖子2 C1 j; x" i- S( ~% Z. m, p& b  e# K
! @- o' K: ?& L* d% \& @( H
我也觉得是污染了。但是就是搞不清是什么污染了。这是有双抗的培养基，这些黑点一直在，而且也不会很快速地增长。其次排除真菌。做支原体检测也是阴性的。所以我就很纳闷是不是遇上传说中的黑胶虫。求大神啊

淡定的摩羯

感觉还真是传说中的黑胶虫