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为什么提取的蛋白放到—80后再次拿出来做Western时发现管底有好多沉淀呢? [复制链接]

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楼主
发表于 2013-12-4 16:37 |显示全部帖子
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回复 微笑流滢 的帖子0 m4 L( [- J. b, z$ |( @
$ |0 f( q: a! S/ y. H5 y
我们在做CRM197蛋白的时候也碰到过类似问题。-80℃保存,哪怕用快速融解,也会有很多絮状沉淀。这种应该属于蛋白质不可逆变性了,可能也有降解。跑电泳的话杂带应该会很多。。Western的电泳,样品应煮过,这是流程,和沉淀的关系不大~  另一个我没碰到过,虚心求教~~
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沙发
发表于 2014-1-8 09:10 |显示全部帖子
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' N# t: u6 \: B" ^- F不知Marker的算不算呢?我通常在Marker旁边的孔上30-40ul,Marker才3ul。。。Marker的小分子条带宽度会略微缩短,不过差异不算大。样品的话,盐浓度会影响到其他孔的条带。
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