求教：CIK细胞可否冻存后在复苏给病人用

月_幻影

个人感觉可以的，冻存液的话90%FBS+10%DMSO即可。。。

月_幻影

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一般都是用程序降温盒来冻存，把加好冻存液的细胞放入程序降温盒中然后一起放入-80℃冰箱，过夜后转入液氮中即可；如果要按温度梯度降温的话，一般是４℃的温度下放置１小时后，再于-20℃放置２小时，然后放入-80℃冰箱过夜，最后放于液氮中冻存。

月_幻影

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“多少细胞一瓶”是什么意思呢？你是要继续培养还是冻存的时候啊？复苏时我们一般是加在生理盐水中离心的。。

月_幻影

回复 星空雾雨 的帖子2 \% b& {! j8 i: m
% N. z! ~# o) j* n
一般冻存时会选择处于对数期的细胞，可以观察细胞的生长情况确定，当然也可以根据你的需要而定；关于复苏：复苏时要迅速放入37℃水浴中，并不时摇动，在1分钟内使其完全融化，使之尽快通过最易受损的温度段（-5～0℃）。这样复苏的冻存细胞存活率高，生长及形态良好，然后在无菌下取出细胞即可。在1000r/min速度下离心5～10分钟（转速应该是不为一，我们一般用1600rpm），弃去上层液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，接种浓度1×109/L（接种密度可根据你的需要酌情计算），置二氧化碳培养箱静置培养，次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，记得及时进行传代操作。

月_幻影

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: z  R. U+ b* a. l
不用客气，关于对数期，如果LZ时间允许可以做下生长曲线啊、、