关于分离脐血加的试剂

细胞分裂

请教各位大神，分离脐血时有加HES吗，如果不加对脐血分离有影响吗，加HES的目的又是什么？

jack1381818

2 K+ C$ G1 L- e7 w0 L
6 B* |; q8 v( P
回复 细胞分裂 的帖子% S* V) m9 B# \7 c

! F8 t/ h( B% r  V個人淺知'不知是否完全正確
$ u. P/ ]' T6 J6 U' t8 Hhes 為一種人造血漿替用品(偶也用於急重症輸血及腎科治療中有用到)
2 O3 k& x7 P8 c3 \" q主要功能是稀釋血漿降低黏滯性'擴充體積+ p0 `3 ~5 U* ^! K$ `. j
成分是小分子澱粉:分子量好像從三萬多到六萬多都有& i) r6 b% f& t  `# c* V- @
可將細胞正負電荷性分開具加成分離效果
! N2 ~' y! C: {& G' K/ r5 F4 O0 Z& }國際上分離技術:可用'可不用依實驗設計而定

deshenglll

回复 细胞分裂 的帖子
) m  W5 ?/ M3 N6 {9 I7 S
4 g! g0 I0 X. |- ?( M要加。有的也加淋巴分离液。去除多余的红细胞

月_幻影

加入HES是帮助你沉降脐血中的红细胞，沉降过程存在因红细胞团向下沉降而推动白细胞向上运动的对流现象，有利于提高白细胞的收率；且血液中红细胞含量较大，如果不加HES沉降的话，那么分离起来很麻烦，而且大部分还是红细胞啊。。。

wangbo19880315

  羟乙基淀粉（HES）是目前最常用的血浆代用品之一。它可改善低血容量和休克患者的血液动力学和氧输送；能够降低红细胞压积，降低血液和血浆粘滞度，尤其是红细胞聚集，可改善低血容量和休克患者微循环障碍区的血流量和组织氧释放，从而改善循环和微循环功能。
0 i, E  _! h, E3 ?5 \  脐血实验大多是为了获取干细胞，在脐血干细胞制备过程中加入HES，利用HES能够降低红细胞压积，降低血液和血浆粘滞度，尤其是红细胞聚集的原理，使红细胞在离心过程中红细胞分散，加强上下对流，增加有核细胞获取率，在我们脐带血干细胞制备过程中直接称呼为红细胞沉淀剂。

huqiao1649

如果是小量分离的话一般就加淋巴分离液，血库的话为减少冻存体积，需要分离掉大量的红细胞而只保存富含造血干细胞的有核细胞就得加羟乙基淀粉HES为沉降剂将红细胞沉降分离去除(高分子量HES，将红细胞网络成钱串状在离心状态下以增大其比重而与白细胞分开 ，从而使红细胞比其他细胞更快地从脐血细胞悬液中沉降下去，从而达到分层)

aaronbct

外國一般保存 臍血約在25-33 毫升, 跟我國現很多血庫保存為5- - 75 毫升不一樣. 主要考慮為液態氮儲存位置有限 (成本問題), 所以加HES 其中一個考慮為減少體積 (把大部份的紅細胞剔除).* ~! B* L/ n; I0 ]5 D& ?

( {" [2 j; a; E$ N7 T2 ~* I另一個考慮點為: 紅細胞急凍過程中, 會有機受DMSO 破壞, 放出血紅素,這有很多研究指出會影響干細胞的VIABILITY. / ^8 d  _1 E0 v9 m* z: r: s
所以很多研究員都會盡可能把紅細胞剔除, 這就要靠HES 了. $ S; \1 Y# T: Q, N: c; f! ]
' q- p# O  f  C0 U* L- Z& C
一般而言, 經HES 分離後的干細胞紅細胞壓積會由原先的4X- 5X% , 下降到2X-3X %. ) m' x$ R+ P, E1 h0 d

7 @0 K( v4 g4 [1 U- k第三, 就是要移植時, 愈少紅細胞, 病人免疫反應會愈小 (因為抗原問題) , 這樣就可以減低病人致敏 / 病的機會.

细胞分裂

回复 月_幻影 的帖子
' L* ~5 [# a' S( i( t4 U, ~1 a9 c
2 h6 d9 R; B6 y% a( V: @8 z) N如何沉降？原理是什么？

wf78365421

建议楼主先读写文献，对脐血分离方法有个大致了解。脐血分离的传统方法为密度梯度离心法。对于大容量的血液，可以先用甲基纤维素或者HES沉降后，再密度梯度离心。加HES的目的是为了沉降红细胞。
( V4 l4 {+ ^4 @. v; \; l* q

月_幻影

回复 细胞分裂 的帖子% }4 l) i, Y1 Z1 b% g9 c7 g5 c4 C

& ?' ?' \) Y0 r! M& ]LZ你怎么还问如何沉降啊？沉降原理我在楼上也说了啊、( E: q' G/ U) d
总之加入HES后静置个20~30min就行，沉降过后LZ你会看到比较明显的界限的、