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求助人脐带间充质干细胞提取方法   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-2-11 09:49 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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想要提取人脐带间充质干细胞,文献上查了很多,比较看中的是:无菌取健康胎儿脐带4~5cm,PBS加双抗充分洗涤,用注射器冲去脐静脉及动脉内的残留血液,分离并去除脐带外膜组织和血管组织,即可获得脐带Wharton胶组织,将其剪为0.5-1 cm3大小的组织块,以DMEM(10%FBS,双抗)重悬。置于37度,5%CO2培养箱中培养7天,使干细胞贴壁,之后每3天换一次液。对数生长期时以0.25%胰酶-EDTA消化传代。取第3代细胞以流式细胞仪鉴定。以CD73, CD90, CD105阳性而CD34, CD45和HLA-DR阴性的为所需的hUC-MSC。想问一下有经验的同学这个方法合适吗?有什么需要注意的吗?
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沙发
发表于 2014-2-12 12:44 |显示全部帖子
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  y+ c$ J3 q$ K# ]% F! a0 P8 H
4 i, m0 z: }8 P3 c) b; y那如果从动静脉旁的组织中能提取到间充质干细胞吗?不是从胶中提取
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藤椅
发表于 2014-2-12 17:08 |显示全部帖子
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& a! K+ }. X8 N( k0 T
  E; b1 U; f& j& O9 T. p3 b4 H; [3 y! N你说的方法是我写的那种吗?

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板凳
发表于 2014-2-12 17:09 |显示全部帖子
回复 孙帅帅 的帖子
' C$ c/ U0 I4 V/ k; y/ _' ~6 e
6 V' M/ B2 P/ x8 A, c啊,好多需要注意的地方,多谢!!!

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报纸
发表于 2014-2-27 09:33 |显示全部帖子
回复 龙七 的帖子
5 Q, a( M: @, O/ Z. {" @# P
0 s% S+ L/ `& n; ^" ~! }& p多谢,我之前一直知道要尽量除尽血液,但不知道是为什么,看了你的解答后知道了
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