HES EB分化问题咨询

hyde

1 V6 J& V! T) e  i* Y) }" x
1 ~; h. p: y2 [. r) h' SHES制备EB，第二天缩成球球，第三天就长成泡泡了，不知道为什么，和文献上的都不一样……养到后面好像泡泡会破掉的，然后就一坨，不圆的
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细胞海洋

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帅花花驾到

我也出现了这种情况，大家觉得是什么原因呢？我已经四五批细胞了T^T

Serene

回复 hyde 的帖子4 s' g( g" H5 w! H" K
8 G. H0 P' F9 F7 V3 Q
我之前养过小鼠ES，悬滴法形成的EB，大小较均一，在贴壁后几天也会有空囊泡产生。但是你这个看起来状态很不好，死细胞太多，可以检查下是不是污染了

Jonathan

查查有没有mycoplasma吧

jingmishensi

没必要加rock inhibitor

hyde

回复 plainxie192 的帖子+ i6 i1 [6 U# K' L' Q) f
' d- |7 }2 F4 W* C9 c/ t
换液的时候没有把死细胞取干净……会有影响吗？

plainxie192

你是用什么方法做的EB，消化？看上去状态比较差，EB松散，死细胞太多（消化太厉害或吹打过度），另外是不是换液的时候死细胞没去干净，可以尝试加rock inhibitor。

hyde

回复 watchen198891 的帖子% M* \2 d3 D0 x# i3 @8 O3 T

* ]( U* P7 p& q4 S. V+ I$ \看上去状态应该还好的吧…20% DMDE peri dish

watchen198891

你做EB的时候确定ES状态很好？还有就是你用什么方式做的EB？