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ips 诱导 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-4-10 17:30 |显示全部帖子
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首先确定你的质粒能包装出有活性的慢病毒,可以在感染慢病毒2-3d后提RNA检测下转入的四因子是否过表达;如果慢病毒有活性,那就可能是滴度的问题了,测一下包装后的滴度,毕竟蛋白超滤柱只能浓缩10倍左右,如果滴度太低就要考虑更换一下慢病毒包装系统了;另外原代培养的细胞传的代数太多也会增加诱导的难度,你可以考虑使用下文献报道的提高诱导效率的方法,例如:加P53阻断剂(siRNA之类的),加ROCK的抑制剂Thiazovinvin,加ALK5的抑制剂SB43142,加巴尔普罗酸等;最后,你用人的四因子诱导猴子的iPS是否也会使得效率低下。
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