胚胎干细胞体内分化能力的检测

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收集15代以内的两个10 cm 培养皿的iPS, 当生长于饲养层上的iPS 汇合至80 %～90 %后,用0.125 %的胰蛋白酶(含0.05 %的EDTA) 消化并吹打成单细胞悬液,置于预先用0.1%的明胶包被好的培养皿中,37 ℃,5%CO2 培养40～50 min ,吸取上清,1000 rPmin 离心,10 min ,加入一定体积的含20 %胎牛血清的DMEM重悬以去除饲养层细胞, 大约1×107 个细胞. 注入5 周龄的免疫缺陷(SCID)小鼠大腿皮下. 3-4 周后, 检测畸胎瘤的形成. 采用HE 染色方法检测畸胎瘤三胚层分化情况.