关于EGM-2的一些问题

vascularbobby

    本人现在准备尝试用EGM-2培养基培养EPC（以前都是用M1991+VEGF+bFGF+20%血清），在晚上看到说EGM-2是500ML的基础培养基外加各种生长因子以及25ML的血清，我想请问的是：' r, M4 z( h* R- u7 j, Q, V+ I
1.那些生长因子是全部加到培养基里么？
* o/ G' ^6 K0 z  [/ P2.血清浓度是不是最好是20%还要自己重新买血清加进去呢？7 {4 V# q$ U: m) c4 B7 Y7 J
3.一般建议是一个月之内使用完，那么可不可以分装呢？（是加完生长因子再分装？不加直接分装？如果不分装长期保存是不是要冻到-20度的冰箱呢？）2 e1 y- [" ]& @$ E3 z( d' ^
    请各位前辈多多指教啊。

pailishi

回答：
9 K+ ?2 K( W" n/ g4 B& T5 q2 J1、全部加
8 c3 |) R8 c; i3 r2、我用CC-3156配的血清的是10ML，2%7 D6 t% I( Y$ x5 `5 v+ W# R! |
3、确实是短时间内需要用完，半个月内最好，我没有分装过，曾经将加了因子配好的培养基分装冻在-20度，再拿出来使用效果很差

vascularbobby

您好，请问你的2%血清养的细胞状态（贴壁、分化什么）如何呢？

细胞海洋

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- i, `! O: ]0 d5 E+ D* _( s: l, h- ?- ]
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样) Z" Y% {2 Y4 l; \

0 c5 z& |3 k- p; F- P, u否则他会看不到

细胞海洋

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/ O- M, L/ h& ~6 Y& S
4 g( b( r7 w' @. A! U" P  M看3楼

honey棉花

请问你养的是什么来源的EPC?有养出克隆吗？

pailishi

回复 honey棉花 的帖子! ]" {! }" Y1 a8 s, |
* T  U8 J# g& j- [4 Z
脐血，EPC克隆+ H1 s6 c. s% r- t9 e
具体你可以看这篇文章，养出来的克隆就像图1中的A，一般10天左右

vascularbobby

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+ R/ Q5 e0 G+ j+ b8 F
% p; H/ }; G# D/ u9 ^2 P) X1 [1 I4 J  ]3 j/ u+ q% w; y
您好，请问你的2%血清养的细胞状态（贴壁、分化什么）如何呢？

vascularbobby

回复 细胞海洋 的帖子/ j' F2 i4 M9 r! i  Y

1 z, m3 V: l' S, O0 e" N谢谢啦。

pailishi

回复 vascularbobby 的帖子* ~6 \4 V6 F% a3 I& s; o2 y
! ^+ Z; m+ p: `$ S
在原代克隆数量上有个体差异，但是传代培养的细胞状态很好