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一共是两个品系，一个已经传了40多代了，一个解冻出来传了10多代就，然后按照% d0 H4 C8 F0 O' n0 }
秋水仙素（100微克每ml 终浓度为0.4微克） 处理6小时 0 P6 `; m, m3 W( b( N {
然后EDTA处理4分钟，洗下来 离心
) p$ f3 x% i( X: q' [3 N2 P0.075mol的KCl 37摄氏度处理30min，. }- y7 n. F: t, |
然后离心，1000转 10min2 h' s8 _5 R7 L6 J6 E% M9 @# P
加10ml3:1甲醇 乙酸 10min; S& s5 D: V4 c! }1 c6 i) B# y
重复 以上一次! }6 I, |! ~- y: K
余下量为0.5ml
/ D# _5 P0 P# y- A0 Z然后进行滴片 将载玻片从冰水中捞起 用纸巾迅速擦拭一遍（表面仍有水）
F7 R% P# S0 t0 b" G$ R- `30cm滴片
, Q, C1 ~) A+ m' G: l2 g/ H2 @7 p# W室温静置12小时，吉姆萨染色 8 g- ^% |+ B6 b
+ t2 d2 p& M2 D4 p; h0 [想要了解的问题：
5 ]3 f# g3 S: ^! a1）假使细胞发生变异，有没有可能细胞在分裂时，。染色体就不会蜷缩了？* n3 {# F+ { v) J8 t
2）在滴片时，载玻片要预冷，是整个扔在冰水中的吗？还是干燥的？
8 @7 C: i% }& F4 [& X% _+ c3）秋水仙素的参数有没有优化的？+ L$ ]. O7 G* {. P( L0 e
4）未染色前，发现细胞核整只的很多，占绝大部分，是哪一步出错了？! y6 t! k/ i# e R0 i
5）在用秋水仙素处理前，细胞是传代时留的底，已经培养了4天左右了，有些细胞都浮起来了 细胞团的话，重叠的比较严重，这个时候，处于分裂期的细胞就偏少了？
6 M5 E+ j9 p% f7 X+ I" ? ^6）图片1 g; j! u' z/ z# _
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发表于 2014-4-29 12:45
