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求助:小鼠胚胎干细胞拟胚体 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-4-29 13:47 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
各位大虾:我养的小鼠胚胎干细胞,拟胚体贴壁培养的过程中,拟胚体没有贴壁,可能的原因都有哪些呀?我用的是悬滴悬浮方法!悬滴三天,悬浮两天,然后贴壁培养,已经过了24小时了,但是在细胞培养皿内还是悬浮状态,没有贴壁!!郁闷死了,请多多指点,谢谢您
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沙发
发表于 2014-4-30 09:57 |只看该作者
1。可能是皿的问题,你用的是低粘附皿还是粘附性的细胞培养皿?$ Y3 }/ K) v+ E7 J
2.  铺层matrigel或者是明胶可能有助于细胞贴壁
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藤椅
发表于 2014-5-8 14:28 |只看该作者
回复 CD603572813 的帖子! ^3 U7 ^: c2 m9 I
+ v( K8 i: N1 F: |$ }/ ~; J
我直接直接用明胶包被的六孔板就可以了啊。你先看看你拟胚体的状态好不好,或者也可以试试第一天不要加那么多培养基,等到第二天贴好之后再补充培养基呢
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板凳
发表于 2014-5-14 10:02 |只看该作者
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我也做小鼠胚胎干细胞向拟胚体方向分化,也做拟胚体贴壁诱导,都是我是悬浮五天啊,你悬浮2天是不是拟胚体太轻太小了,所以贴不了壁啊!有问题我们相互请教啊
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金话筒 优秀会员 小小研究员 热心会员

报纸
发表于 2014-5-14 10:38 |只看该作者
我认为最关键的还是拟胚体的状态,拟胚体的状态又深受细胞状态的影响,每次做拟胚体的时候一定要保证细胞活性好才可以。
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