求助 关于脐带间充质干细胞分离的问题

听不到

之前随意做都把细胞养出来了，现在怎么都做不出来，想知道是不是我每天拿出来看的原因。不过脐带组织块铺板后，总是发现有未除净的血细胞，又怕组织块又飘起来，就用PBS轻微冲，然后补液，但是始终是有残余的血细胞冲不干净。在铺板之前我是用pbs洗组织块并离心3次的，但还是除不净血细胞。
" d$ c/ K8 @- N想咨询一下大家，一般是如何除去血细胞，还有是不是应该在前几天静置完全不动？

cloudy1234

血细胞除不掉也没关系，细胞照样可以养起来的

听不到

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- P. l* M$ \* e- J3 _所以关键是前几天不能动需要静置吗？

青云之上

除红细胞就离心，实在想除干净就裂解液，但是培养间充质细胞红细胞影响不大，随着培养时间红细胞就会慢慢挂掉的，组织块还是注意培养基培养条件等~~~

gghywtfz

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4 r* t6 Q: }6 J5 }: ?必须静置的。6 w% T& w7 m) t5 G
动培养皿细胞周围微环境以及刚分泌出来的那点贴壁的东西就动没了，就贴不下去了

flylover1221

红细胞太多也会影响间充质细胞的生长环境，但不会影响间充质细胞从组织爬出。至于没有间充质细胞，我个人做的时候并没有离心，是不是这个原因导致的。其实去除红细胞在获得脐带组织用PBS清理干净，在剥离动脉和静脉的时候清理好，去除血块就可以了。在间充质细胞生长后，可以传代培养一次就没有那么多的红细胞了。静置就是减少晃动，相信在观察的时候也很小心取出放回的。

ccst4838318

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: C5 c: O; U1 l( ]
组织块冲洗干净后铺板，先放少量培养液，如果是75的瓶子放3-5ml就可以，等组织块贴壁贴结实后，换液直接倒掉后添加或者直接补加同等量新鲜培养液均可，一般培养10-14天即可见间充质干细胞爬出来，红细胞不多的话可以不用管他，但是前期还是要尽量清洗干净的好

569981454

红细胞除不出干净对细胞生长不会影响太大，基本上没有关系。要想除去红细胞，除了使用裂解液，也可以在培养中多次换液逐渐除去红细胞。前几天换液时小心点不要让组织块飘起来就行了。

a52602589

血细胞。。。这不科学吧 你怎么分离的  动脉都没有去除么  如果去除了 是不可能有血细胞的  75的瓶子加10ML  组织块是完全不可能飘起来  

听不到

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; @! J5 D# Q' }# p3 R& h' b! E. t我是很小心的，但是培养了大概6天了，还没出来，这样还能出吗？我之前分离出来那次因为是第一次做，直接加液很多，然后漂了很多，我觉得就不行了，就一直静置没看过，后来到了第9天的时候试着看了下，长出了好多，我就一直想知道大概多少天能爬出来