铺feerder的问题 - 实验室综合讨论区干细胞之家

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楼主

发表于 2014-5-17 11:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

现在觉得处理完的feeder冻起来在复苏，每批跟每批，甚至每管跟每管细胞量都不一样。这批能复苏六个孔，那批可能铺六个孔就稀了。各位是计数铺的还是按照经验来的？没有发生过特别稀或者特别密的时候么？求教啊！

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沙发

发表于 2014-5-17 11:22 |只看该作者

说明你自己技术不准确和细胞操作的时候没有把细胞充分的混均匀

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半壁蔷薇

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藤椅

发表于 2014-5-17 12:57 |只看该作者

回复千细胞的帖子

比如说什么技术不准确？。。。。

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heirrii

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板凳

发表于 2014-5-18 10:04 |只看该作者

计数不准确？6 J: K) M+ ]" s4 x) P

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半壁蔷薇

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报纸

发表于 2014-5-18 16:24 |只看该作者

回复 heirrii 的帖子1 H: q0 W# `' N' h, `* M* p

一般记数铺多少啊？比如一个六孔？

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heirrii

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地板

发表于 2014-5-19 08:30 |只看该作者

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amanda1988

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7楼

发表于 2014-5-19 09:37 |只看该作者

细胞冻在-80的话，冻得时间越长，死细胞会越多，复苏效率越低，你原来一支细胞可以复苏到一个六孔版，时间长了后可能只能两支细胞复苏一个六孔板，你冻的时候可以多一点细胞冻一支，或者直接冻在液氮，在液氮里的复苏率会高一些。

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luyue6453

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金话筒优秀会员美女研究员积极份子

8楼

发表于 2014-5-19 11:36 |只看该作者

回复半壁蔷薇的帖子/ Z8 L- K. {6 m' l( x. N9 U

请教一下处理完的feeder是什么意思，想做这方面的实验，不知道怎么处理feeder

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shihuijunm

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9楼

发表于 2014-5-20 16:00 |只看该作者

回复 luyue6453 的帖子
% E/ y. |8 _" W: U |; L; t
就是用丝裂霉素C处理MEF细胞，或者γ（X）射线辐照MEF细胞，我们用的X射线一般是80kv 0.5h，照射完毕后，消化细胞，计数2×10^6如果不冻存就使用的话1×10^6。

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yinyu0511160