CAR-T技术原理

aochongyu

嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）是将能识别某种肿瘤抗原的抗体的抗原结合部与CD3-ζ链或FcεRIγ的胞内部分在体外偶联为一个嵌合蛋白，通过基因转导的方法转染患者的T细胞，使其表达嵌合抗原受体(CAR)。患者的T细胞被“重编码”后，生成大量肿瘤特异性的CAR-T细胞。（摘录）了解的大神讨论一下！

chb611301

需要详细点的资料

maoyy2011

顶一下

842195369

CAR-T重组质粒的构建+ K. N$ A1 C/ f5 E
1. 选择载体：腺病毒、慢病毒或其它能高效转染T细胞、表达嵌合抗原受体的载体。
9 }0 q/ d/ E  T& i2 H2. 选取靶点：即肿瘤细胞特异性或相关的膜表面蛋白，如B淋巴细胞的CD19。
$ i  E* [* k5 [( ~3. 获取特异性好、亲和力强的抗体的基因序列：这是CAR-T技术的关键和难点所在，
' x5 d: x- U& D2 r% ]* \8 k1 D因为抗体的产生是免疫原作用下基因重排的表达产物，抗体基因编码序列在
  S7 t7 s/ e, rNCBI的数据库是查不到的，而且在目前阶段是不可预测的。动物来源的抗体片; M3 x/ S. u8 n/ c  E) @+ q! P
段在人体内可能会诱导针对此抗体片段的抗体，削弱长期的治疗效果，所以，往0 \7 I0 |, k9 I- [; Y
往需要把动物来源的优质抗体人源化。% V& Z' g+ a; \* G7 z" N- M6 A4 O
4. 构建重组质粒，感染T细胞：除抗体片段的编码基因，还要加入跨膜区、CD3胞
9 \) G- V2 A) e, X$ k内区、共同刺激因子以及白介素的编码序列。也是关键技术。: W, v0 c9 }, v6 f
5. 体外验证：嵌合抗原受体是否正确表达于T细胞表面；CAR-T细胞能否有效扩
+ G. K* D1 ?" N6 a2 u( o5 k增；CAR-T细胞是否能识别病人的肿瘤细胞并溶解肿瘤细胞；释放细胞因子的种' Q$ t4 C1 v" F/ Z' G! L- Z
类和数量，等。9 U' L6 a! j  f  A' q# t/ V# q3 L
体内验证：输入人肿瘤动物模型，活体检测CAR-T对肿瘤的消除作用。

842195369

CAR-T治疗--肿瘤靶向免疫治疗- E, c5 v7 [1 X+ {: m$ }0 C' b
• CAR-T，全称 Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。
8 S" ^& x0 P/ P• 通过将识别肿瘤相关抗原的抗体片段scFv和CD3胞内信号域 ITAM在体外进行基因重组，生成重组质粒，再在体外; W/ R+ n' w9 u6 H! f: y
转染到患者的T细胞，使患者T细胞表达能结合肿瘤抗原的受体。转染后经过纯化和大规模扩增后的T细胞，也即
' L, S& f, H. R" j. L, nCAR-T细胞。CAR-T技术利用病毒载体将 CAR稳定表达在T细胞中，经过活化扩增，进入体内后能选择性识别并杀死肿瘤细胞。$ \) a: A! ~/ Z) p
• 可以特异性地识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性较常规应用的免疫细胞大幅提高，并可克服肿瘤局部免疫抑
3 C  m7 z8 \- B2 ?4 E3 o制微环境，从而打破宿主免疫耐受状态，杀灭肿瘤细胞。
3 _$ W. w7 Z+ i. j7 _肿瘤相关抗原：tumor-associated antigen，TAA，是指一些肿瘤细胞表面糖蛋白或糖脂成分，它们在正常细胞上有微量表达，但在肿瘤细胞表达明显增高。
+ z' ^! k) `1 `. ~( o4 X2 TITAM：immuno receptor tyrosine-based activation motifs,免疫受体酪氨酸基序活化信号域, a6 \8 ?4 k% v( A% h4 u# N

ET生物人

回复 lyj-0017 的帖子
( p1 X$ z. R& j; \, S+ z3 c' w% \1 d
西方国家的公司目前是应用于临床研究，国内的医院和公司也有啊

wang255425

目前已经在开发的第四代CAR-T技术，包括整合表达免疫因子、整合共刺激因子配体等。

315997864

CAR-T细胞技术已经发展出3代，第1代CAR在胞内只有１个Ｔ细胞CD3ζ受体的信号区；在此基础上第2代增加了1个共刺激分子信号；第3代增加了2个共刺激分子信号。这些改进是基于一系列体
. [7 R, F# w% G' a; J" e外和体内的实验和临床探索。目前，用于临床治疗研究的主要为第2代CART细胞技术，其中用来携带CAR的载体主要来源于逆转录病毒和慢病毒

15063363804

wendy11243723

刚刚入门，学习中。。。。