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标题:
CIK加自体血浆回输
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作者:
momoenn
时间:
2014-6-2 14:20
标题:
CIK加自体血浆回输
出现云雾状东西，又过滤一遍，消失，大家遇到过这种问题吗
作者:
levell
时间:
2014-6-3 09:21
没有照片不好判断，估计是死细胞的DNA，培养中注意细胞密度并及时补液
作者:
momoenn
时间:
2014-6-3 12:20
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levell
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, q& O% a$ A; g( S
. Z$ _8 b2 g, ^
是回收细胞后回输的时候，加自体血浆过滤以后，仍有云雾状。但是用白蛋白就没有这种现象
作者:
levell
时间:
2014-6-3 17:54
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momoenn
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, G9 U* z% E1 }- Y" V- {% y
: R) N1 _6 x- f( P" J7 D1 X1 z/ W7 B
自体血浆灭活后有没有冷却后离心呢，都会离下来很多沉淀的，然后再用上清培养细胞的
作者:
lyj-0017
时间:
2014-6-4 11:31
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momoenn
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% U, k y1 D" b
- v$ z4 N' A2 n! x+ l4 M
即使是加，添加的肯定也是自体血清，不可能添加自体血浆啊，你先看看血清和血浆的区别。
作者:
momoenn
时间:
2014-6-4 12:28
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levell
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7 O0 P, H9 Q9 ~* z# w
4 ~* D, X; _& M7 A4 H/ D; l
冷却后离心了的，能看到沉淀。加的上清。培养细胞的时候没有加，是回输的时候用的
作者:
momoenn
时间:
2014-6-4 12:30
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lyj-0017
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% @$ h8 F/ \. T+ [: \2 C( |+ M% j& a
请问你们的自体血清是怎么获取的呢
作者:
指下人生
时间:
2014-6-4 12:52
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momoenn
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% f+ l; L6 b7 ~$ a2 E
: Q9 A7 j! n) b6 L8 j: i6 T4 X2 Z# c
灭活后 离心再添加就不会出现了
作者:
指下人生
时间:
2014-6-4 12:52
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momoenn
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' }0 h3 b- e3 `# Z q9 G& u# N; [
# D3 n3 ]9 f3 \' O4 P$ L
灭活后 离心再添加就不会出现了
作者:
lyj-0017
时间:
2014-6-4 14:42
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momoenn
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. s; M' p7 e5 a& c4 e% v! ~' N
5 g0 I5 z7 M- s- @; d
俺们的不加血清的
作者:
momoenn
时间:
2014-6-4 15:11
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指下人生
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/ d$ L8 d5 O$ B1 j
& H, r- \: I k1 G
灭活、离心加回输过滤 还是有云雾
作者:
jxydiandian
时间:
2014-6-4 15:42
血浆最好需要灭活后的，虽然回输对病人没有影响，但是有些病人的血浆容易产生絮状物，也就是纤维蛋白，使用前需要除去的
作者:
levell
时间:
2014-6-4 16:38
抗凝得到的是血浆，非抗凝得到的是血清，你们用的什么管抽血呢
作者:
levell
时间:
2014-6-4 16:40
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momoenn
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( M) \' c: a0 Z9 K
* `2 M# D( k( z/ X
用肝素钠或者肝素锂的抗凝管，枸橼酸钠的容易有沉淀
作者:
momoenn
时间:
2014-6-4 18:25
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levell
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* J r& x I$ X! @% n
! `1 h2 t" @4 C# C
您是搞科研的吗？我们用的商品血液保存液，是后者。血如果不抗凝，怎么往后实验呢？毕竟CIK细胞才是我们最终的目的啊。
作者:
momoenn
时间:
2014-6-4 18:26
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jxydiandian
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* ~- ^1 i& C- Y
3 f1 c/ [. O: c; Q) d: S# M+ d! n
已灭活
作者:
stang198651
时间:
2014-6-4 19:26
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momoenn
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) K* H. B: N$ T( @
: t! R3 }9 k" D' |9 X0 ?
用自体血浆养细胞的话，血液要用肝素钠抗凝。柠檬酸和柠檬酸钠或者EDTA等抗凝的血液，不可用。因为这类抗凝剂主要是结合血液中的钙离子，而阻断凝血通道，培养基中含有钙离子，将这类抗凝剂抗凝的血浆加入到培养液中，就对使纤维蛋白原析出，出现云雾状东西，血浆加的浓度高还会出现整个培养基类似凝胶状。灭火并不能完全使纤维蛋白原析出。
作者:
momoenn
时间:
2014-6-4 19:37
额。貌似都理解错了，我说的临床应用的时候，用血浆取代白蛋白，加入细胞生理盐水悬液中
作者:
levell
时间:
2014-6-5 11:12
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momoenn
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4 K6 I7 N1 q, M, X
5 n2 z+ j Y$ s K% [' H
所以抗凝得到的不是血浆吗，我们也是用血浆的，有听说过用异体AB血清的，不过很难弄到吧
作者:
Tim
时间:
2014-6-5 15:46
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levell
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, m4 J6 N7 v8 Y- o
0 ^4 J7 j7 N3 v1 v5 D3 M; a& g5 a
血浆是抗凝离心后得到的！血清是促凝后得到的！
作者:
luyue6453
时间:
2014-6-5 15:54
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momoenn
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7 k1 O. H1 U; j8 T Z2 A
! t0 M9 S2 E# `1 m6 z
你就不要加自体血浆了，直接加1%的白蛋白就可以了，
作者:
stang198651
时间:
2014-6-5 19:08
本帖最后由 stang198651 于 2014-6-5 19:10 编辑
% i2 x- [, G2 Y/ S, C( W: V
2 M& q$ m6 H# y2 b% s4 y
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momoenn
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. o) A, b, P2 `; ]
' E) A6 i; x! N( h( p; ~3 j- |3 K
大概理解了。血浆，加了抗凝剂的，纤维蛋白原存留在血浆中了。血清，不加抗凝剂的，纤维蛋白原完全变成纤维蛋白而析出了。血浆，一般灭活，冷冻，离心，并不能完全使纤维蛋白原析出。可以灭活后，-20℃冻存，然后37℃水浴解冻，然后上一万转以上离心机离心，能比较干净的去除纤维蛋白原。-20℃冻存，然后37℃水浴解冻，巨大的温差会使纤维蛋白原大量析出来。大量析出来之后再加入细胞回输液中，应该不会出现了。
作者:
momoenn
时间:
2014-6-6 10:16
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stang198651
的帖子
8 O+ ]# q1 q) q) h: |! t
) E1 D6 u: j9 m
那血浆56℃灭活的意义是什么呢
作者:
momoenn
时间:
2014-6-6 10:16
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luyue6453
的帖子
M8 Z% Z- B7 Z. q, P( b2 j# j0 F3 f0 X
. V2 Q7 S! o- P& P0 r* d
是，现在直接加白蛋白。
作者:
zhrt
时间:
2014-6-6 10:45
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momoenn
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J* k [2 |& G2 o8 `! J
& M+ z9 r4 _2 }) d! A( v
出去纤维蛋白，防止与培养液中的钙离子结合出现絮状物。这也是血浆与血清的区别
作者:
momoenn
时间:
2014-6-6 10:47
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zhrt
的帖子
) P! H. Y2 z# B
& V. f; I0 D3 g: J% Y! h) A" H
谢谢
作者:
chenjxcd
时间:
2014-6-6 11:36
估计是纤维蛋白析出，血浆会出现这个问题，血清就不会了
作者:
gd541767393
时间:
2014-6-25 10:21
自体血浆可以，用白蛋白2%的
" H. F# A2 u+ u5 l4 }
; ~4 r. r# N" p
作者:
伊诺强
时间:
2014-6-25 16:03
灭活后，冷却，高速离心，0.22过滤基本就没问题了
作者:
单个核细胞
时间:
2014-6-30 09:09
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momoenn
的帖子
( O3 T* I' p3 P8 Z% m# Z
2 M6 O% `( E+ Q5 y+ _) ]# f
这是灭活补体。
作者:
yanglixia
时间:
2014-7-7 08:57
是不是加入白蛋白的时候针头过火了，太热容易导致白蛋白变性成絮状
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