干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 20130|回复: 4
go

[请教] 关于WB非特异条带 [复制链接]

Rank: 2

积分
102 
威望
102  
包包
265  
楼主
发表于 2014-6-18 17:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,在做western blot的时候有哪些细节或者操作能够减少或者避免非特异条带的出现?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
1  
包包
6  
沙发
发表于 2014-6-18 17:40 |只看该作者
整点好抗体
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
120 
威望
120  
包包
461  
藤椅
发表于 2014-6-18 21:07 |只看该作者
样品:纯化蛋白当然比杂蛋白好;抗体:一抗使用单克隆抗体当然优于多克隆抗体;显色:显色时间不可以过长,时间长了也可能出现非特异性条带或者高背景;操作过程:注意封闭的时间,如果用牛奶要现配现用,一抗孵育时间也要注意;总之,抗体是关键,抗体的特异性强,出现非特异性条带的几率会显著降低。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
152 
威望
152  
包包
500  

积极份子 美女研究员 小小研究员

板凳
发表于 2014-6-23 12:33 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
抗体是最重要的,好抗体的话即使操作不太仔细也可以出很好的带;如果抗体不太好用的话就注意样品尽量干净,封闭足够时间
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
55 
威望
55  
包包
281  
报纸
发表于 2016-8-15 15:48 |只看该作者
有一支好的抗体才是王道
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-20 08:49

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.