胰酶消化组织

baicaikua

为什么我用把胰酶消化胎盘，羊膜什么的组织块，很快就形成胶状物质了，完全分散不开，加了各种酶都没用，胰酶浓度越大胶状越明显，而且组织块也消化的不好，过滤后的液体里细胞液不多，为什么呢？求大神解答

单个核细胞

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建议配合使用磁力搅拌装置，转子可以很好的分散胶冻状组织团块。' b. ]( x8 Z$ h3 X% u  t
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消化胎盘、羊膜等组织时，可联合使用Ⅱ型或者Ⅳ型胶原酶与胰酶消化。& }5 M$ w3 s" K) |; j4 ~' y  ]

9 B; m7 V; G+ g, `6 d  P) M9 P补充资料：' g' y7 I/ N9 K& g
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• 求助用胰酶消化胎盘羊膜亚全能干细胞的最佳时间是多长时间？' V$ ^# J0 D# [+ ^# n
  http://www.stemcell8.cn/thread-76864-1-1.html
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• 双酶消化法里面，是胰酶消化下来的细胞多，还是胶原酶消化下来的细胞多一点呢？6 |# X' P4 s2 o0 h( F' j! N
  http://www.stemcell8.cn/thread-63961-1-1.html* J, K1 F+ V2 O& }9 ~/ X& Q
  

青云之上

你用的是哪个类型的胶原酶？是不是浓度太大了？我们实验室消化胎盘用胶原酶A，我做乳腺肿瘤干的时候消化用四型胶原酶加DNA酶，加透明质酸酶消化4小时，或者4℃过夜都没有问题~~~

baicaikua

我是先用胰酶单独消化，不管怎么样都有胶状物体（使用前组织反复清洗 了，不太可能因为其他杂质的原因）组织越小胶状物越明显，大家消化液有胶状物么？消化一段时间后把组织洗干净，然后用胶原酶和DNA酶消化，收集细胞悬液离心可以看到很多白色沉淀，但是一计数，完全看不到细胞，是不是消化下来的细胞都死了啊，是的话为什么细胞会死呢？

watchen198891

最好不要使用胰酶消化，胰酶消化会出现这种问题，胰酶消化的时候要注意很多的技巧，我没有那个技术，最好是把你的组织块剪碎用胶原酶和DNA酶一起处理，这样的效果要好很多，个人意见仅供参考。

细胞海洋

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