关于间充质干细胞用不同液体重悬后计数的问题

thor0504

同一份细胞离心后将沉淀用“生理盐水（0.9%氯化钠）”重悬，再次离心后与用“白蛋白（终浓度0.5%）+生理盐水”混合液重悬，分别计数，但结果后者总是高于前者，这是什么原因导致的呢？大家有没有遇到过类似的情况？

thor0504

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1 [9 \+ ^$ v5 v9 @+ D没有人遇到过吗？自己顶一下~

aochongyu

我给你顶一下，同样求解

chichao0000

thor0504 发表于 2014-7-15 12:18
' ~1 n7 n' e9 V- N5 x" |- \同一份细胞离心后将沉淀用“生理盐水（0.9%氯化钠）”重悬，再次离心后与用“白蛋白（终浓度0.5%）+生理盐水 ...

  o) R. {& p& d& _  U% U
你试过再次离心后还是用生理盐水重悬，再计数细胞吗？可能这种方法得到的计数也不同于第一次重悬。我没做过类似实验，只是我认为即使是同样数量细胞，连续测两次得到的结果也不会相同，细胞计数只是获得一个相对准确的数量。另外，你用什么方法计数细胞？

thor0504

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8 W. C- l- o/ I
6 }4 d: g3 i3 \3 w4 v$ U盐水重悬的方法用过的，前后会有少量差距，计数结果一般时向下走，除非细胞完全没有混匀，否则像这种离心后计数反而提高的情况很少出现。

binglovekun

感觉细胞是不会增殖的那么快，还是计数操作的问题，不过离心后计数增多的情况确实不多。
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thor0504

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! D# p; A+ t" T) l
因为是冻存后复苏的细胞，初始是用盐水重悬的，没有再从新进瓶培养，应该不会涉及细胞增殖的原因，计数操作的原因倒是有一定可能，但是进行了几次重复性的实验，基本每次都有类似的情况发生，而且还换操作人尝试过，我倒是考虑下一步试试不同的重悬方法和重悬液，另外再进行下多组对照，看看是否还有类似的情况发生。

thor0504

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- G9 L8 v* i$ z: A  J另外我们用的是constar的计数仪，感觉平时计数的确不是特别稳定。

jianglei_sd

两者能差多少啊？白蛋白有一点保护作用。

xbs530515

用计数板，手动计数试试看，白蛋白会不会对计数仪有干扰？