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yiwuya007

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楼主

发表于 2014-7-18 10:26 |只看该作者 |正序浏览 |打印

全骨髓法分离的大鼠MSC，尽管每次都用PBS洗2-3次，但是还是有很多圆形的杂细胞，而且粘附在伸展贴壁细胞上面。请问大家怎样去除这些杂细胞？

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8楼

发表于 2014-8-19 22:47 |只看该作者

你可以倒掉上层培养基后，轻轻拍打一下培养瓶瓶壁，用PBS冲洗一下培养瓶，倒掉上清，再到镜下看下杂细胞还贴在细胞壁上吗

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cyagen

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7楼

发表于 2014-7-27 23:05 |只看该作者

消化的时候胰酶作用时间要掌握好，全骨髓贴壁法主要是根据不同的细胞贴壁能力的不同进行纯化的，一般控制再1min之内，没有消化下来的细胞基本上杂细胞了

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yiwuya007

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地板

发表于 2014-7-18 15:40 |只看该作者

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现在还没有图片，下次拍照，请你看看

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yiwuya007

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报纸

发表于 2014-7-18 15:39 |只看该作者

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# V* |7 ~9 \# @# F) @- `7 D/ D
我也觉得奇怪，每次这些圆形细胞不会粘住，现在这批粘住了，怎么洗都不掉

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青云之上

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板凳

发表于 2014-7-18 15:35 |只看该作者

你确定那些圆形的是细胞吗？最好能上个图吧，按理说正常的话应该不会，培养基有一定的选择能力，不适合的应该会挂掉啊~~~

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yiwuya007

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藤椅

发表于 2014-7-18 15:23 |只看该作者

回复青云之上的帖子/ q+ b( X$ ]2 Q7 h
+ Y. x$ a, \, d# A
我不过细胞筛，
传代两次了，而且每次都用大量的PBS洗2-3次，关键是这些圆形的细胞粘在贴壁的细胞上面

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青云之上

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沙发

发表于 2014-7-18 14:47 |只看该作者

你过细胞筛吗？过一下，然后PBS充分洗，原代的时候会比较杂，但是后边一换液传代就好了~~~

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