H1细胞传代时种密了怎么办

susan901017

如题，传代第一天后发现细胞太密了，细胞对我而言很珍贵，很怕会分化。mTesR里培养，无feeder，单细胞+Y传代，跪求高手解答

星光灿烂

其实还可以用EDTA传代，传代时速度需要稍快一点，之前也试过mTESR, 但是冻存复苏效果不是很好，后来又回归到E8

yinjian1104

我们实验室也用mTesR养，每天换液，传代用dispase。分化的也很少。

生命之轻

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  M* }% r8 |$ I嗯是的。Dispase只能消化成团块、不能成单细胞，并且用移液管刮也是团块的操作方法。3 E" C) h, J1 R* X! w$ l
更正一下，我们也有用acutase消化成单细胞+Y传代的。之前说法有误

woshizh

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" A& z% {4 v& H  N* i9 O: MDispase只能消化成团块、不能成单细胞吧，并且用移液管刮也是团块的操作方法

缥飘实验员

回复 生命之轻 的帖子9 {* l! O7 J9 G1 b) L& m- h5 T0 }
8 H4 J& {( g+ T  {
培养体系一样，传代是Dispase消化，查了下，好贵，我们现在用 accutase 消化3分钟，就复苏时加 Y，传代就不用 Y，不知道传代加 Y与不加 Y 有什么作用，求问？
9 o8 E  d8 d' P1 _1 ~& y! t9 ~2 B. O我现在做的是复苏传代冻存细胞，养着养着老爱分化，第四天的样子就看着有些分化，在显微镜下标记刮除。求问怎么减少分化？7 D( N) {0 w, O) O( Q

/ c2 b  X! E: P, ?  s1 H: x

生命之轻

“mTesR里培养，无feeder，单细胞+Y传代” 这里我们实验室也是mTesR里培养，无feeder，但是我们传代是Dispase消化，用玻璃移液管刮下，吹打三下（注意不能吹得太散！） 按1:6传代种到预先铺好matrigel的6孔板中。你用的单细胞+Y，我们只有做分化是才用这种方法，我这单细胞+Y应该是利于分化，正常传代不能这么做！

hustdreamer

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+ T7 {5 N5 m: c8 D9 h, x1 A. y能否具体说说友方单位是怎么培养的？培养的效果如何？是否容易分化？

yeungfan

等长满继续传就好了，一般分化的很少吧，如果分化的多的话，就要用吸引器吸走了。

susan901017

回复 hustdreamer 的帖子0 f0 x! {. R& t! v

2 O0 I1 G7 A7 @! ^4 k我觉得挺容易分化的，但是友方单位一直这样养