各位老师，求人脐带间充质干细胞

colins

你用的培养皿是一次性的吗？好像有些耗材反复使用就不适合细胞往外爬了，你有没有再用些新的培养皿啊？现在关于脐带间充质培养的文献有很多，如果你是照着做的话，应该没问题，建议你换换新的培养皿或培养瓶吧

colins

你用的培养皿是一次性的吗？好像有些耗材反复使用就不适合细胞往外爬了，你有没有再用些新的培养皿啊？现在关于脐带间充质培养的文献有很多，如果你是照着做的话，应该没问题，建议你换换新的培养皿或培养瓶吧

倒腾细胞

师兄就是搞不定脐带的，果断转向养大鼠的

fuyinsheng

首先MSC在脐带的华通氏胶中，我看你好像没有剥离华通氏胶这个步骤，而是直接剪碎的，好像也不用全程在冰上进行，室温操作也没问题。另外你说已经爬出细胞的传代后不贴壁可能是胰酶浓度过大或消化时间太长了，MSC还是比较好消化的。

水念人倦

我看你的描述，你去掉三根血管后就直接剪碎了？这样会存在很多杂细胞的，会有竞争抑制。你第一次成功爬出的时候有镜下的照片么，确定是MSC么，有么有多角形的杂细胞干扰？

yinff1988

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; Q4 `: q. q) p/ z( X8 O* k. w
0 M8 \2 K+ K( I( f每次用完我都清水刷干净，然后高温高压，这样做可以吗

荷荷

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  H% n9 T0 |: J( B2 Z
! B* N) ~1 b. w" ~9 d我一直这么操作的，有时候脐带还在4度过夜，原代分离过程也一直常温，细胞爬的很正常。你的手术器械没问题吧？

yinff1988

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1 ~" h" M+ P& m- M* J9 I! q, i, [
之前我就是直接加培养液，这是刚改的方法，但是都不行

荷荷

试试直接加培养液( n2 ?" @# s. \) t7 w* v

yinff1988

只好自己顶了