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请教各位大神有关间充质成骨诱导问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-24 12:58 |只看该作者 |正序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
最近在做脐带间充质的成骨诱导,感觉诱导开始的第5天细胞密度就有些过大了
7 O8 {; d4 I5 R- A; x3 l) \3 l昨天换液时,把细胞层给吹起来了....
8 e7 H' [$ S/ b% H4 e$ W; ]
  J7 v2 l0 w8 O# m! g请教各位大神,成骨诱导期间如何保持一定的细胞密度呢?
: p9 |' L' G( t* ?2 h0 r1 n+ c9 Z有同事说可以提高Dex的浓度抑制细胞分裂,可有这种说法?
2 l3 ?2 y$ x. @  p3 K+ s& E- k. E; G# b, L! m0 N
附带我的诱导培养基配方:
8 K# q1 w" x! S. x  O; r  ^' A7 P( aa-MEM+10%FBS
/ m! p9 C( L5 j6 J  v' k0 F1 _& WVc=0.2mmol/L
5 u6 Q9 I7 G1 e4 Db-glycerol phosphate=10mmol/L
* H4 f8 A1 m3 Q5 w$ O. K  M% \4 jDexamethasone=0.01umol/L
' r) a: g( Q' B$ `+ n$ M8 i0 T. Y& U0 U7 @
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地板
发表于 2015-6-24 19:50 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-6-24 19:55 编辑
$ J/ R6 w  ?1 n4 }3 j% h, u$ d( j6 a4 t# f" O  o3 B8 u6 G
回复 荷荷 的帖子
( a8 B6 p& [1 T! C0 o- W2 G. v3 }) \
( `/ d6 T# H' N: }你好,请教成骨诱导培养基成品买的是什么牌子的,谢谢,

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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2014-9-29 10:24 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子3 z1 a' T! m/ N$ ]* z
; A# P/ Y" ]* o" T6 V% q4 T
长满也没关系,换液的时候小心些还是不容易把细胞给吹起来的。我经常是最后染色的时候容易把一部分细胞吹起来。
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板凳
发表于 2014-9-29 08:42 |只看该作者
回复 荷荷 的帖子
0 \4 T0 Z4 B9 B  `/ ^7 V% n! Z
, _/ V# D8 M5 T0 w# n俺也是60%左右开始诱导的,然后5天细胞就长满了......
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藤椅
发表于 2014-9-25 16:34 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子
( N/ M; q; x5 S  {0 O7 t: y  z* {+ a
我一般是用成品诱导培养基诱导的,感觉60%融合时开始诱导比较合适。
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沙发
发表于 2014-9-25 10:03 |只看该作者
你可以考虑降低MSC接种密度,我做的时候24孔板用的细胞量不到10(4),成骨分化的时候效果还不错
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