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[请教] edta加入胰酶中的作用是什么 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-10-9 14:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 sumanlin 于 2014-10-9 14:43 编辑
+ E1 _: k3 C8 P3 l4 K5 _4 `
# O/ b" [2 R" p" e7 @我们用的GIBCO胰蛋白酶溶液 标签上面有写 Trypsin-EDTA  我知道Trypsin是胰蛋白酶 而EDTA是用来干嘛呢?
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沙发
发表于 2014-10-9 15:06 |只看该作者
是这样哒,EDTA是一种可以螯合Mg2+、Ca2+的螯合剂,细胞表面很多结合蛋白都带有这个Ca2+的,因为Ca2+的作用细胞之间还有细胞与培养瓶之间才能连接,所以加入EDTA也是更有效率的将细胞从培养瓶上消化下来~
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发表于 2014-10-11 12:18 |只看该作者
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' j8 u$ @; [8 P$ S0 u% l+ b" C6 c9 H( B5 ~- ]
EDTA是一种螯合剂,它可以螯合Ca2+或Mg2+,而细胞表面很多和培养皿或培养瓶结合的蛋白都是带有Ca2+或Mg2+的,把这些离子螯合后,可以加速细胞和培养皿的脱离,促进消化.EDTA是2价阳离子螯合剂,所以能螯合钙、镁等离子。上皮类细胞的连接存在“桥粒”结构,是细胞间最“牢固”的连接,但桥粒的形成依赖于钙离子的存在。在胰酶消化细胞时,加入EDTA,可以破坏细胞的桥粒结构,使细胞能够分散成单个细胞。通俗地说,就是破坏细胞间的粘连。
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发表于 2014-10-12 12:54 |只看该作者
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我们都是自己配的胰酶,里面也加的有EDTA,其实如上面将的它本身具有分离细胞的作用
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报纸
发表于 2014-10-12 12:54 |只看该作者
我们都是自己配的胰酶,里面也加的有EDTA,其实如上面将的它本身具有分离细胞的作用
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地板
发表于 2014-10-14 08:32 |只看该作者
EDTA螯合剂,楼上都有说明,主要针对难消化的贴壁细胞,很多细胞,胰酶消化,不加EDTA是消化不下来的,所以根据你实验室所养细胞种类确定是否需要添加EDTA,毕竟EDTA会使细胞膜出现小空泡,对细胞会有损害的,易消化的细胞尽量不加EDTA,浓度一般是0.01%
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发表于 2014-10-15 10:54 |只看该作者
我们直接用EDTA消化293T,不加胰酶
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