human iPSCs 单克隆率求解

何奋斗

本人最近在做iPSCs水平的基因敲除，需要把iPSCs消化成单细胞之后，再培养成克隆。目前碰到的问题是，单克隆率极低，大概1/1000。培养基是mTeSR1, 加了10uM Y27632. 0 i. X1 h' [, q: D+ f3 u2 H
请有经验的朋友指教！谢谢先~~

何奋斗

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我是小白  不太懂论坛规则  哈哈

细胞海洋

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做广告的 删除了

saifast00

不知道楼主的实验进行的如何了，我现在也遇到这种问题，干细胞特别是人ips貌似不是很支持单克隆传代，不过我用的是E8体系，如果按照楼主说的用的是mtese-1+rocki也不行，那就真的有点没信心了；不知道楼主用的什么方法来敲基因？cas9？电转质粒？