干细胞相关培养基

qiqishichaoren

干细胞相关基础培养基例如MEM，按照配方应该只含有氨基酸，而不含蛋白质，但是用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒居然测出有蛋白，而且含量挺高的。所以很费解，不知道有没有人知道这种基础培养基内是否含有我们不知道的蛋白存在？

lovesxj941

Hyclone有成分表，其中不应该含有大量蛋白的。

qiqishichaoren

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2 w! K* X) J! U2 e1 J4 N
7 w% c3 D' [! Q" y是的，照理说是没有蛋白的。有没有加入一些我们不知道的蛋白成分，不知道大家有没有做过这方面的检测。

cjsbaicai

蛋白质容易变性降解，所以一般来说，培养基里只含有细胞基本生长成分，这也就是为什么我们要加细胞刺激因子，以维持细胞特性，并使其快速扩增的原因

sdwzg119

关键在于你的试剂盒测量蛋白含量的方法是怎样的，之前有的方法还只是测量氮元素的含量来推算蛋白含量呢。( e/ R2 g" H9 C

. ]; I5 K- b& W/ O所以.........

qiqishichaoren

回复 sdwzg119 的帖子3 r2 ^0 n6 Q8 R. o) m
5 h- M/ @, `& Q/ a9 j9 q# g
BCA蛋白浓度检测 ：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。  亲，你们有想过基础培养基里有没有蛋白存在呢？蛋白和生长因子应该是在血清里才是吧？

sdwzg119

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1 T; n! ^3 C7 N; T( H  b) S. h回复 qiqishichaoren 的帖子1 u* C! _& i6 u' {: ^$ U7 |

5 S2 H. [* q; B6 W6 a/ N3 |  T哪问题来了，是不是有其他物质可以还原CU2+？？  某些氨基酸，硫酸铵等等

qiqishichaoren

回复 sdwzg119 的帖子1 @3 Q& ]" L0 E# ^: t5 N' @

6 M8 I: J. K6 U3 u谢谢，请问有测过培养基蛋白质浓度吗？这样说的话在培养基内的蛋白无论用那种方式测定，都是有干扰的，只要缓冲液是不纯的。