请教：干细胞分化之后的检测手段有哪些呢？

flydragon5

新手提问，请版主赐教，谢谢了

leijun

帮你找的
, ?7 \5 B0 t, H! V# f3 y- J* u诱导分化检测举例. f5 Z8 {* ?' s5 I! [6 ]' m
1.向脂肪细胞诱导分化 　6 K, |5 y7 F- d: T* X) b6 \
以每孔 2×104的密度将细胞接种在25cm×25cm塑料培养瓶和6孔板,诱导分化体系为含10%FBS、10-6mol/L地塞米松、100μg/mL 1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤(IBMX)、50μg/mL抗坏血酸的IMDM培养基。每3天半量换液1次。第14天采用油红O染色,于倒置显微镜下观察脂肪滴的形成。
5 E% a. N2 U3 a' h: e5 ?& l' `2.向成骨细胞诱导分化 　 - |3 F2 d: J7 J6 }% Z. T7 l+ F8 I6 c8 P
细胞以每孔2×104的密度接种于25cm×25cm塑料培养瓶和6 孔板,诱导分化体系为含1.0×10-8mol/L地塞米松,2.0×10-4mol/L抗坏血酸,7.0×10-3mol/Lβ-磷酸甘油的IMDM培养基,每3天半量换液1次。第14天用Von Kossa染色检测钙化基质沉淀。

痞子的烟头

1# flydragon5

痞子的烟头

干细胞分化后检测手段，我提几个常用的" l1 w: s# D  Q$ J2 k: c& U
RT-PCR
! @: _. Y% @; Y/ yFQ-PCR / Z2 u6 ^& B7 M& m
细胞免疫组化
# h) J3 Y) e; \1 N2 \  pFACS及分选
+ b- `$ j' H- J+ }$ W, k( l* k: o5 S等等/ K4 i& Q; b- r3 @7 @" c( I! b. C
不知你具体想从哪些方面进行检测' G5 o3 V. r; n3 @
其手段可以由自己选择比较合适的

痞子的烟头

如果有什么问题或经验  t9 ~# n1 ~2 x! P5 p
我们可以交流  o( f7 h& d' c7 E  s; N: @
因目前实验比较多- a) e& h$ G: N; x2 O
所以不能及时回复，还请见谅！

flydragon5

非常感谢版主和各位朋友，受小弟一拜

痞子的烟头

不用客气，
7 i! _) F5 ]6 ]; {7 x相互交流才会进步！
9 J: K" ]0 A7 P- e) c& s有什么问题以后我们可以随时讨论！

zhaoxiuyu1984

7# 痞子的烟头
2 L6 U. N- w  E4 z4 t! V
7 k+ \# H  ~% b0 ]; z' P5 ~. ?# \) N' S1 y7 I! f
你好！我目前要做乳腺干细胞分化   我也不知道什么方法做好！尤其是对其标记物的确定！方法上也没做过？请问您做过乳腺的吗 ？如果没有能够给于些建议吗 谢谢了

痞子的烟头

8# zhaoxiuyu1984
7 w% ]- c* _+ x& ~  s% S! S0 E$ q3 t- G$ _, P: T: S

, y0 o4 ~3 \  A4 |不好意思，刚看到你的贴子！
) R" ~8 b) C( u乳腺这块我没有做过，但目前关于干细胞分化的常用的也就三种方法，
( }( W1 B+ q7 ^! b1. 细胞因子诱导，这需要你大量阅读文献，关注最新的NSC3 X* n, ?8 b- t# U* j% l& f) S" D
2. EB
  B7 W  X) ^9 L2 ~! X- _% D+ A3. 共培养
6 M1 }; W# h6 X, F' Y# f$ ^有关实验细胞或实验中遇到的问题，我可以给你点建议
/ U4 j8 Q3 n, S但实验的具体protocol需要你自己摸索！7 W/ U0 C$ @: u0 f# F% b
祝好运！

aoppolle

成体干细胞向造血细胞，神经细胞，内皮细胞分化的鉴定。我已经用过了形态学和表面标志物的检测了，还需要做一下功能鉴定。不知道该做哪些。