hiPS传代后细胞成团状飘起原因是什么？

wanglimaomao

这个现象我以前遇到过。分析原因及解决办法可参考以下内容（本人经验）：4 p2 o! n( T0 |3 @% ^
1.包被Matrigel是关键步骤，首先确定胶原质量是否合格，4°解冻后，是否为液态，如果是胶冻状说明不合格。稀释比例1:50-1:60,4°过夜，使用前37°固化至少1小时。经验表明，37°时间越长，底面粘附的蛋白成分越多，高背景下可见褐色蛋白丝，均匀分布。因为不同批次的Matrigel浓度不同，所以稀释比例会适当调整。或者延长4°和37°孵育时间。培养过程中，未用的matrigel孔要用胶原溶液养着，防止干掉。' k5 M4 w# a: e. I
2. 包被的6孔板一般2周内用掉，整个培养过程中，换液，都要轻柔，这些胶原有时候会容易脱落，而且细胞也会降解胶原成分，一旦胶原成分降解或者脱落，细胞就会成片脱落，凋亡。所以每次传代或者换液时候都要适当看看没有细胞的培养皿底部是否能看见蛋白丝。如果发现变少，是可以补加一点胶原（用细胞培养液稀释的），或者及时传代
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wanglimaomao

纠正错别字，相差显微镜下是黑丝蛋白丝