关于DMEM/F12 培养基的问题

Charis

本人初来乍到，请教各位前辈：) w# a1 x1 L7 J: D% {% Q" m
我的Hyclone DMEM/F12培养基中已有L-谷氨酰胺，但是生产日期为六个月前，需不需要重新加入L-谷氨酰胺呢？  l1 S- \, u# I' G) J8 f9 n! h+ a' W
还有，感觉培养基的颜色没有Gibco 的DMEM+F12现配的深，是什么问题？对细胞有没有影响呢？8 t2 `( o3 Z' M' \, r* k
谢谢各位！

wangxiang

回复 Charis 的帖子5 K7 W' z5 K7 f/ [, C7 @
" @  M" T& I4 J2 Q
虽然培养基中已经有了，但是为了保险还是要加一点吧，至少我们是这么做的，因为在保存过程中成分问题说不清数，你培养什么细胞？颜色深浅可能是品牌和批次问题，也可能是PH的变化导致，颜色不能说明问题。

wangzhiqi86

回复 Charis 的帖子
) T, C2 Y$ o& ^6 b" T6 ]. c& ?/ U+ n9 m  z4 a9 @4 j3 i
你说的培养基应该是液体的吧，L-Gln会随着时间慢慢降解，如果生产日期是6个月之前，建议你用之前加入额外的谷氨酰胺。
) p( R4 e6 j* B3 l现配的培养基深是pH更高所致，可能是加入NaHCO3之后搅拌时间过长，分解成CO2走了。你可以用pH计测量，如果太高，就加一点HCl调回7.0左右。

MZzhang

我们组用的DM/F12也是已经谷氨酰胺的，但使用前我们会自己再添加一次；宁可饱和，但不能不足。

dollar007

商品化的培养基开瓶后尽快使用。超过一定时间后要补加谷氨酰胺。或者可以直接买含Glumax的培养基。

bleachmen2

谷氨酰胺-L的降解很快的，还有就是要注意避光保存，最好用之前补充一点进去。

alicia_86

我们也用的GIBCO的培养基，如果避光保存的话问题不大，你自己补充的话，稍微少点量就可以了。。还有培养基变色问题不大。