BMSC冻存液配置及复苏后效果

niuzer

由于BMSC培养还是比较难的，不敢轻易尝试浪费，复苏存活不好，太心疼了！那么针对BMSC，有没有专门的配置？
& n3 ?7 n# Q" P) T1 _9 J目前流行版本很多，血清：DMSO/9:1，用培养液：胎牛血清：DMSO/5:4:1的也很多（据讨论说是北美实验室配方），但是很少人分享复苏后的效果。- w) O# @0 q3 W; l# n- g3 d! L
在此立贴讨论，希望冻存过BMSC的战友们分享下冻存液配方及复苏后效果如何？6 V7 N+ _1 ~% s! \; k0 Q; m% v
希望大家产所欲言，分享经验，以备大家借鉴

奇幻雪蓝

用培养液：胎牛血清：DMSO/5:4:1，一直用这个，复苏细胞活率在40%左右。当然这里的运气成分很高，运气不好，10%的也有！

niuzer

回复 奇幻雪蓝 的帖子1 |* a5 x( g4 x
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复苏成活率这么低？是因为DMSO的质量问题吗？我们实验室有人买的便宜的DMSO 成活率很低，换了好一点的就好了，不过他养的是肿瘤细胞，你目前用什么冻存BMSC？

cjsbaicai

我们用sigma的的DMSO，复苏存活率有90%

dollar007

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- K/ E! z  a4 m0 R- L' s9 j# d
复苏细胞活率在40%左右，太低了吧！我们没用程控降温仪，也能达到80%以上。如果你冰柜梯度不够的话，现在有种冻存盒，你可以试试。

莫邪小仙

我们养的脐带间充质，复苏后活率好的时候才达到80%，差的时候60%多，用的程序降温盒，感觉冻存工艺要再优化。细胞回收率也挺低的。

sjh15123382094

我们用的是培养基：DMSO=9:1，复苏两年前的细胞活率也最少有50%，基本能在70左右。

维维睡啦

  y% K( g+ B& O% R0 p2 f6 v4 `

% A* L" L$ ^7 w" \, D& N( J现在用的比较多的冻存液有三种：1.FBS:DMSO=9:1  2.培养基：胎牛血清：DMSO=5:4:1  3:HES:培养基：白蛋白：DMSO=5:2.5:2
# k3 X6 i8 f7 i; Y第二种方法活率最低，前两种方法DMSO使用量较高，对细胞损伤大，第三种方法活率较高，对细胞损失较小，但是成本较高，最适合免疫细胞冻存。一般冻存时间不是特别长的干细胞和细胞株用前两种都可以。

孙帅帅

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" T- Z& h; @) g, q8 `0 U5 }
& z5 H- x) f  `5 aHES:培养基：白蛋白：DMSO=5:2.5:2    这是什么意思啊？

维维睡啦

回复 孙帅帅 的帖子) h: L6 q/ x3 w  H- @
9 e) K5 H" P7 ~) K# ~) A* \( g
不好意思写错了，是HES:培养基：白蛋白：DMSO=5:2.5:2：0.5