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目前细胞示踪技术主要有病学示踪和非病理学示踪。
5 |( _" z b( \, P: j4 Q5 y% H6 j病理学示踪技术需在移植后的一定时间内处死实验动物,心肌切片后进行免疫荧光或免疫组化分析。9 a9 x: k; B; H) K" ?
标记方法主要有以下几类:. I+ T( Q7 y' d8 `) C2 ^# }* V# |. u
(1)荧光染料标记:
, l$ y" J2 ?4 d& a常用的主要有烟酸己可碱(Hoechst)、1, 1′-双十八烷-3, 3, 3′, 3′-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸盐(Dil)、二脒基苯基吲哚(DAPI)、PKH67和PKH26等荧光色素,细胞移植前用荧光素进行预先标记,移植后可以利用荧光显微镜观察荧光标记干细胞的存活和迁移情况。( x& ^, F! J7 m. \0 `% u
(2)核酸标记:
5 E8 `0 F% D7 Y; D5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)、氚胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)能竞争性地参与细胞DNA合成,从而达到标记分裂细胞的目的。
- b# O% h- C+ t5 u, J- N8 H- ^4 P(3) 基因标记:- _- a; o" k2 c0 G
改变细胞基因,使其表达特异性的标志物:如绿色荧光蛋白(GFP)、β-半乳糖苷酶(LacZ)。
5 P* s1 s3 Y4 s" _1 K(4)选用雄性供体和雌性宿主,利用Y染色体作为标志物。
7 O* Z7 D9 e* g: P
1 @8 n) `& u$ y非病理学示踪技术主要应用于活体,主要是无创性影像学技术,包括直接标记示踪(磁共振显像和放射性核素显像)和报告基因显像。0 `1 Y$ S/ W4 ]/ Q
磁共振显像技术中比较成熟的是超顺磁性氧化铁的应用,如Feridex和Resovist,而标记心脏治疗细胞的放射性核素有111铟(111In)、锝依莎美肟(99mTc-HMPAO)、18氟-脱氧葡萄糖(18F-FDG)等,
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0 y" O# |, F7 x; q4 l4 R( H l5 |忘了在哪篇文章看的了,希望对你有用 |
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