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[讨论] 紫外照射时间过长会杀伤培养箱内的细胞么?   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-4-11 09:54 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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       昨天,下午2:00打开培养室的紫外灯为实验室消毒,下午由于忙其他事,直到第二天早上才关闭。可是,细胞培养箱内的肿瘤细胞全死了!不知道是不是和紫外消毒时间过长,臭氧浓度过高造成的?另外,细胞生长过程中,培养箱的气体和外界发生交换么?怎么交换?  S8 c) v: [2 D% m4 ^+ D) w' m1 f
备注:
4 Y, [$ K* y+ _' K1.细胞培养条件为:温度37℃,二氧化碳浓度:5%;4 L1 @! [' n  T5 p
2.培养箱为热电气套培养箱;, T  f; g. m7 V: v$ c7 X+ y( K
3.实验室环境为万级洁净室,整个过程中风机关闭,室内温度为常温;2 p  V9 o1 a5 h
4.之前紫外灯消毒时间均为0.5H,细胞生长正常。
8 |$ }) F6 u; C& [8 g+ m
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27楼
发表于 2015-9-11 11:21 |只看该作者
回复 奇幻雪蓝 的帖子
- B/ U" Y' ^0 X0 l; j
$ J" A% u4 G5 q% M. \肯定不是紫外的原因。我们实验室细胞室的紫外经常过夜,也没见到谁的细胞挂了。而且我们的细胞室没有通风,有臭氧也留在细胞室了,细胞照样是好好的。
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26楼
发表于 2015-9-8 09:32 |只看该作者
本帖最后由 tingting2113 于 2015-9-8 09:33 编辑 * K/ T- I8 J0 O9 @- A- N

' @  i  H. a+ [* w回复 奇幻雪蓝 的帖子
$ ]( ^5 v" b/ ?0 I8 v' e& e  \' e: q, m# R
不是紫外线的问题,紫外线的穿透能力较差,培养箱门没开不会有影响的。培养箱的气体交换,主要是二氧化碳气体向里面补充,不开门外面的气体不会进入,所以影响不大。
1 [4 g9 I9 J; t% U" ?$ L分析细胞死了的原因,你可以看一下培养箱的显示是不是准确,是否需要校准。
% l6 \# N+ g" a  G紫外的原因应该可以排除了,以前我们开更长时间都没事。
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25楼
发表于 2015-9-7 16:20 |只看该作者
只要不产生臭氧的紫外灯管,照时间长了没有影响的
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24楼
发表于 2015-9-7 14:44 |只看该作者
我们实验室的紫外灯经常性的一开大半天,没见到对细胞有什么影响,而且紫外线的穿透能力比较弱,一道玻璃门就差不多挡住了吧。至于紫外灯产生的臭氧,我觉得不可能这么容易进入培养箱吧,培养箱与外部气体连接的通常是后面的一带滤器的小孔,但是培养箱要保持二氧化碳浓度和一定的湿度,气压相对外界应该是正压,臭氧不可能进去多少。说一句,我这培养的是淋巴细胞。
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23楼
发表于 2015-4-16 09:41 |只看该作者
应该不会吧,我们都是照一个晚上,如果不开门应该没事吧
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22楼
发表于 2015-4-15 17:05 |只看该作者
回复 大少爷 的帖子( K9 n. n8 C9 m& Y1 ^: a
' s; g* h4 |. @
CO2培养箱腔体内除了有CO2还会有空气,箱体的空气滤器是有气体交换的作用,如果密闭空间长时间大量产生臭氧,臭氧理论上是会一点一点渗透到箱体内的。培养箱自带的二氧化碳调节器只能调节二氧化碳,不能调节空气。所以时间长了,室内臭氧多了,是会对在培养箱中的细胞造成影响,问题是,时间要多长,产生的臭氧量要多大才会呢?另外,臭氧极不稳定,是否会在接触培养液和细胞之前就分解了呢?没验证过所以不知道
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21楼
发表于 2015-4-15 14:54 |只看该作者
回复 大少爷 的帖子& g& K$ f9 z/ R$ H7 W
: ?" Q. J6 U/ c' @5 \) V
非常抱歉 这问题我不懂 加分不适当 还望谅解

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20楼
发表于 2015-4-15 10:47 |只看该作者
我养的HaCaT也遇到过类似情况,不明原因的细胞就漂了大半,怀疑过电力中断,但是最终没有定论
0 a8 C- [, a3 ^3 ]. L我的实验室紫外照射是自动计时的......
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19楼
发表于 2015-4-15 09:59 |只看该作者
借助风险管理中鱼骨图这个工具进行分析一下,细胞培养受那些因素影响呢?主要受人、培养箱、环境及培养基影响,对这些因素一一进行分析排除,应该很快找到原因。这样思路更清晰合理,更容易找到答案,比在这里猜想应该更科学合理些,因为大家并没有看到你的整个过程,这样做同时也符合GMP中强调一个基本原则——可追朔性。
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