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楼主: cinderella颖
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SD大鼠间充质干细胞做免疫荧光的相关问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-5-19 12:08 |显示全部帖子
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回复 cinderella颖 的帖子# E4 p8 t* Z4 @" c) U' ?: p
5 c* f) a  r3 G2 y) K7 M
如果从骨髓里面冲出来的MSC要做表面抗原鉴定比较麻烦
5 ]2 E% |" o9 [$ a7 v. i5 J$ e0 {给你提供一点知识
8 P% a# N# P8 E/ r# pCD106 CD166 CD29和CD44阳1 ^3 h$ B& |8 _: V5 c
CD34 CD14 和 CD45 阴基本可以判断是MSC' [: f. z+ c1 D8 Z0 X
倒不如做个分化实验来鉴定 比如做诱导分化来以分化能来判断
4 i0 {5 s/ _& x( D* }) E% b: u低分文章要求不高
; Y0 j. ]+ K4 r9 ]6 d3 o. k如果真的嫌麻烦
0 K6 E! A; N9 F7 i" c% _' j- A, O交给你个必杀 就是买( B8 M0 _( p% w
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沙发
发表于 2015-5-21 15:21 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子
" |/ c" M$ j  g6 ^  ]
& f. p8 S& K9 v; W9 t# `细胞定量问题没有遇到过6 W' h- N: F8 ~2 z. z
请问下 您是想做绝对定量还是相对定量呢?
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藤椅
发表于 2015-5-22 11:58 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子. v+ @1 {( n) }5 a) [

8 l0 D5 @$ N5 G: e能否回答我一些问题
6 a! s" f4 o3 _, s1,你的MSC是从哪里取?) ~7 K0 ^5 A3 Z8 e  f
2,你定量是定MSC的哪里的量?(比如在骨髓中的量or提取细胞培养后的定量), K) ~4 c& S6 g/ b( w
3, 别怪我多嘴,你确定了量之后,后续实验有什么想法么。(如牵扯隐私可不必回答)
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板凳
发表于 2015-5-22 11:59 |显示全部帖子
回复 倒腾细胞 的帖子' U2 C3 K, S& ]" u! x

/ Y' l1 j( f' ?3 Z# I  M不好意思 现在无法回答你这个问题 # `0 z/ m- ^9 g
因为我也不是做定量的
7 A- M4 D! |8 y9 T, J等我查查文献在回答你好么?

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报纸
发表于 2015-5-22 12:45 |显示全部帖子
回复 倒腾细胞 的帖子; E: v% Z5 l1 V; k% b5 v! V

$ F% E9 O9 t! R' b) U% kto 倒腾细胞" Z4 C- Q, r, I
cc 灰姑娘颖
/ f, [# V: [# u- M* E& W+ P
# J, R. {# H% r2 n1 @. G, C不好意思 我可能表达有问题
" q3 ?! p; F' l. _我是想问下 你是要定量所测细胞中MSC的量 + N- D0 w( N: f) [& `3 G* I. |0 z
还是想要进行MSC和HSC量的比较(假设在骨髓)
5 A) q6 |" k  A; X现在用的比较多的方法是细胞流式很不错
5 J% T( M. a% ^; x$ k8 Q我稍微查了下 附件有个文献可以参考下
7 P) ?- }3 d- V8 a+ ?8 H4 F. }  W" K; U3 l! A5 e) V& Q
灰姑娘 0 C; i% e2 K! v. S' Y: I2 g
! }) J4 R" B- U9 F3 |% ^# V
你做免疫荧光染色是为了做个查MSC做半定量实验么?) E: e2 A. P- w- E$ H
当然如果有文献支持的话 也是可以的 7 K4 n6 [* b& u4 Z: g  h7 c- p
方法还是跟着文献来好一点 有根据
% q' m! B( N. V3 F! L. M+ _% t容易被编辑和审稿人接受6 S2 e3 s% J+ A- w) t! H5 ~

* ~" B2 ^8 ]% G) o. y- a% ]" Z如有问题欢迎讨论
0 D/ Z% j5 e! r$ N; x( R
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地板
发表于 2015-5-26 10:57 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子; ~3 R& u  k  ~0 m
: |% C+ x- [1 p% ]  f: M+ {# [6 u; k" V
怎么说呢 ' m+ i  J- W; l) |, [. h3 H2 y7 R4 ^
如果有仪器的话
$ r" o( l3 ?: O5 y6 d" j1 f! z当然做流式是最好的
' s+ V# V4 w+ b* m/ @; u8 |$ G. m没有的话
+ E- j4 b- i# w' O7 Q* J也只能做免疫荧光了
  I9 g( K& ]! v# C' W9 O毕竟染色不是一个定量的方法
: @9 W8 K2 @- [4 D8 Y$ v我们lab一直对于染色后的定量作为一个没有办法的办法0 \- W; U2 L+ M
当然如果写论文的话 9 s+ |- [+ V8 T
最好能找到免疫荧光做定量的引用文献比较妥当。' W6 o: S9 O5 e1 j: M8 C
根据实验室的情况吧
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发表于 2015-5-26 15:02 |显示全部帖子
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! v  z" |! J/ q; D; l4 F% e
) x4 |# a3 K1 i7 E/ f( ^* Q# e5 H不客气。( {/ \3 n, v- n
这个我无法回答你。2 l# m, a1 {  [; m
参考datasheet吧。6 e% ^; T! n2 P0 Q; p- N
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