大家冻间充质干细胞的时候冻存液比例是多少啊？

sunnyhuan0629

我觉得是得看你平时培养时用的培养基是FBS的还是无血清的。如果是FBS的，那么直接拿日常培养的培养基+10%DMSO 就可以的了。如果是无血清的培养基，直接按这个可能复苏效果会打折扣。这时候可以按照你本来用的DMEM：FBS：DMSO=7:2:1进行冻存，只不过复苏的时候，可以选择重悬的培养基里添加一些ROKi inhibitor ，一般终浓度为2uM即可，这样可以大大提高贴壁细胞的存活率，我们一直是这么操作的。

sunnyhuan0629

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恩，理论上血清比例越高，对于细胞在冻存时候的保护作用越大。这个是肯定的。但也有一个度，因为血清毕竟含有很多不明确的组分，会对日后你复苏之后的细胞状态，和你的后续实验，产生一些影响。因此，可以采用重悬时候添加roki inhibitor等的办法来“曲线救国”啦

sunnyhuan0629

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* Z/ W+ E+ q% O 恩 是一个信号通路ROCK Pathway，这个信号通路有很多调控剂的，包括拮抗剂和抑制剂，可以根据你的需要选择，一般都是小分子化合物，成分明确，结构确定，我们用的是Thiazovivin