脐带提取MSC，新手求教

chrindy

; d2 w  s5 K, j请问各位大侠，如果要把剪碎的组织块放进培养瓶里面，大家都怎么放的呢？？我用显微镊夹又觉得很容易把平底刮花细胞不好贴壁，用枪头吸又容易堵枪头...还想问一下我要是种25cm的培养瓶要放多少组织块呢？？生长因子大家都用2ng/ml的bFGF吗？？我看大家对组织块的大小也有不同的见解，我觉得要是剪成1mm3真的好难接种啊，如果用培养皿可行性高吗，会不会很容易污染？？

2420527

直接用镊子夹进去啊

2420527

或者用培养基重悬，将移液管的前段掰断，用移液管加进去

chrindy

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谢谢！

chrindy

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请问在剪脐带组织块的时候需要在冰上操作吗？是不是蘸点血清再种组织块会比较容易贴壁？？

水念人倦

用镊子或者小勺放进去就可以了啊，个人没有用过皿，觉得容易污染。' M; u" e2 g  Q4 o! W
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贴块的话，25T的可能60-90块的样子吧，块和块之间0.5cm距离就好。
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& H& g( {5 H% [5 Q* s! U3 J具体大小的话5mm^3以下就好了，真的到1mm^3换液是很容易冲下来的。0 X8 f9 |( W. |. C- T9 A

* q7 m, `, T0 Q# w8 o$ w另外因子可以不着急，一般DF12+10%血清都没啥问题。

chrindy

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好详细！谢谢！！

月_幻影

把移液管前端掰弯然后刮进培养瓶铺瓶就行、还是很方便的

丨叶落知秋丨

组织切块，而不是消化，要保证切块的内层也就是有干细胞的那层朝下，否则细胞是不能碰到皿底贴壁的。一定要注意细节！

chrindy

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. s7 ^; i$ p# V2 A  T- T9 C- q意思是指脐带的内侧壁要朝下吗？我以为去除羊膜以后就没有关系...