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hyde

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楼主

发表于 2015-6-8 22:57 |显示全部帖子

这个方法之前好像都是快速检测KO比较多吧，大片段KI的话还是PCR测序，最后southern，KO是应该不能区分单敲双敲吧，只要退火后两条带组成有gap就会切吧。KI如果两条染色体都是KI了，那不就没有效果了吗？和WT是一样的，两条均一就不会酶切吧/ ~+ @& `7 Y$ _+ x

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hyde

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沙发

发表于 2015-6-8 23:31 |显示全部帖子

反正talen cas9 ZFN最初的那几篇讨论技术效率的都是那这个酶切亮度来看效率的吧，是为了最初确定打靶工具效率的，不是为了建立单一细胞系的吧，即针对一个mix状态的检测，不是单克隆阶段的测试方式

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藤椅

发表于 2015-6-8 23:33 |显示全部帖子

类似于最初收样品PCR看峰图的杂峰比例，不太适合单克隆鉴定时期的鉴定

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hyde

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板凳

发表于 2015-6-8 23:38 |显示全部帖子

KI的时候可以特异加入一个酶切位点，这个比测序要快一点

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