淋巴细胞分离液使用

121qwq

回复 nkcell 的帖子9 m! a3 B8 \$ {8 i
" s4 u/ ^% H  c& C* l
是使用多少g的离心力比较好呢？我们用的是600g

nkcell

淋巴分离液的品牌不同，离心力就不同，国产的一般400G就可以了，进口的最少500G

老姜

1 我们实验中遇到吸MNC层时吸得Ficoll层太多，加入生理盐水后离心，MNC离不下来，将这部分细胞又再分为两份，再补入生理盐水（实质是将Ficoll稀释）后细胞才离下来。所以，不主张多吸Ficoll层的细胞。( Z9 K. |- O, Z# Z' r: @+ o4 f' T
2 吸入Ficoll层过多的红细胞，若是进行培养，红细胞几天后即死亡，如果是培养要求换液还好，如果只是添液死亡红细胞的“废物”怎么处理？对细胞生长多少都会有些影响的。
; c0 H1 \, H  I; B6 m0 ^3 淋巴细胞分离液中的泛影葡胺等成分对细胞的生长有影响，所以，一般经Ficoll分离的细胞后均要洗涤三遍。

121qwq

回复 老姜 的帖子
- G- f* _- a. a' t6 a. M# z3 Y" Z7 C7 h  y7 }3 g
非常正确，因为Ficol液的密度是不一样的，所以必须稀释之后细胞才能离下来，吸过多是不行的，红细胞吸多了也很头痛，我不知道怎么处理好

老姜

我们是750g

小刘

多吸白膜层，上下在白膜层2厘米左右，不能吸的太少，到时细胞培养不起来很麻烦，如果吸的分离液层较多的话，用生理盐水多洗一次，为了确保期间，能多吸别少吸，尤其碰到分层不清晰的情况，多吸没坏处

hrty2015

尽量只吸白膜层，下层淋巴分离液吸得多，红细胞的数量会增加，影响培养计数

ryy123

回复 121qwq 的帖子! t+ t0 h4 t+ `
0 N1 ^' E$ J: g2 ~% `* D
是的，只吸云雾层，其它吸多了会影响培养的

ryy123

回复 suoweiyiran0411 的帖子" M1 v* a# f7 M: A

9 O" e+ I+ P5 Q- j; T$ W说的很好

ryy123

回复 suoweiyiran0411 的帖子
9 U1 u; M  A* |' {, x4 L! Y4 [1 l+ q/ _7 H1 i) G
在吸取白膜层时有没有遇到有红细胞悬浮其中的？是不是离心太过造成的红细胞破碎啊？