继续请教SHSY5Y这个细胞系的培养问题

baby00000003

0 i4 N4 K3 b; g3 X/ a7 v

* C( X* a: D5 w8 _问题：SHSY5Y这个细胞系使用HDMEM进行无血清培养就会出现无数的小黑点么？
9 a2 ?4 {, W8 }% e- h9 h* ]6 p+ E8 h" C
最近在做这个细胞系的分化诱导，使用的是无血清体系，然后出现了如下图的状态& F3 |6 T8 O, D) N+ J( o0 u  x) j
下图是使用RA诱导过3d的" g2 d5 E9 L: z9 [% v

2015-8-3 11:32 上传

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- U+ r0 U, L9 P+ K2 y$ X2 L) I
怀疑过是污染，然后一个一个原因的排除，而且专门做过菌培养都是阴性; w1 F/ b" Q5 h) |5 v/ {
下图是无血清不加RA的$ j. f6 V% r3 c8 v( I6 Y

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+ Y- C- U/ x+ E1 f下面这个是换了另外一种无血清培养基培养的，没有那个点点
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* a5 ?% l7 ^& v7 @! `再来一张把HDMEM和另外一种培养基混合在一起培养的
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% X" h. r" l3 k: P7 a! F' P- z总之，结论是，只要是含有一定比例的HDMEM的无血清培养基，就会出现那种小小的点点8 ?. n/ y7 z8 ]0 a7 p
这个细胞平时是用HDMEM＋10%FBS传代的，各方面都很正常$ Q6 ]! f4 ~$ P
4 D: t) Y( V. g
可有做过这个细胞诱导的前辈分享经验呢？
6 S- O; N; m" b4 l2 O) Z2 Z( O2 _* R先谢过～

ccwei0615

very interesting. even i do have experience with shsy5y before but i never suffered with this problem. would like to know others' comment.

baby00000003

* o& R! _* F5 L

7 U/ T. ^0 ^7 ?; W/ M* M回复 ccwei0615 的帖子
: L1 s3 V2 u0 q! b: H# H0 _9 O! o0 ?  L" o) g& M
have you done SHSY5Y--->DAergic neuron induction?' w. `, t' e- A% Z  Z0 B' B, Q6 e
would you please share your formulation of ECM and induction media?
. ^5 {4 E1 `2 x( oi suggested laminin as ECM + HDMEM+0.25XB27 but leaders kept ignoring my idea