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CIK细胞运输损失太多   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-8-7 15:16 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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由于其他实验室需要,将我们实验室正在培养的CIK冷链运输过去。在这边拿走的时候计算了密度、活率等,细胞状态很好,但是到那边实验室第二天再观察时,袋中出现了很多絮状物,密度也降低了很多。这是什么原因呢?有什么好的办法解决吗?
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沙发
发表于 2015-8-7 15:21 |只看该作者
细胞成团了,吹散计数数量应该差不多,活率就不好说了,annexin/PI跑个流式看看吧~
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藤椅
发表于 2015-8-8 10:27 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子
" O( o. T6 P: a: u2 D
3 m( t9 P6 G& d' H' m3 o5 ~主要是问问有什么好的解决办法吗

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板凳
发表于 2015-8-8 10:42 |只看该作者
这次运输,加了2%的血浆,情况改善比较明显,还是有细胞团,但是没有絮状了。活率记录是90%。拿过去之前记录是99%以上。
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报纸
发表于 2015-8-10 08:01 |只看该作者
回复 momoenn 的帖子! |+ F& E: v: b0 K7 y
0 @* {& ?  d1 m  M
90%也可以啦~
6 B' o9 L; F  k  i" d习惯上是2%HSA+PBS
2 b* f! V, z" I/ s条件允许的话,也可以培养基运过去再离心
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地板
发表于 2015-8-10 10:00 |只看该作者
里面加白蛋白。或者自体血浆,就能让细胞有营养、、
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7楼
发表于 2015-8-10 10:35 |只看该作者
目前你这份细胞没有更好的解决办法。以后转移细胞时,直接将在培养的细胞(细胞培养袋)发过去,不需要冷链运输,最好放在恒温冷藏箱,保证8度左右,通过航空运输,尽量缩短运输时间,到那边实验室后,在进行培养观察,补液,检测,收集。
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发表于 2015-8-10 10:48 |只看该作者
本帖最后由 免疫与细胞 于 2015-8-10 10:59 编辑 * u$ W! D1 K7 z2 q1 B
7 S: k: ^2 l* Q( q4 x; ?8 o
首先,请不用担心,细胞运输途中生长状态水平下滑非常正常且无法避免,运输后活率90%已经非常不错,不会影响继续培养的。如果要最大程度保证细胞运输时细胞状态,可以从以下几个方面着手:
9 \) o9 T, B5 T1 s1.缩短细胞运送至处理间的时间间隔:细胞出发地制备完成后立即交运送人员运送,选择最快捷的运送路径,到达接收地后立即处理,没必要等到第二天吧。& z5 I2 {4 g! D2 ]" F3 P
2.运送温度设定:运送的温度和时间存在紧密关联,运输时间长则相应运送温度低一些,下面是一点建议,仅供参考(1小时内可以送到就可以选择常温运输;2小时—4小时,选择8-15℃;4小时以外,选择4-8℃运输)。% ^( N# P6 d' G2 j
3.运送保护液成分:顶楼上的同学(最好是一定浓度自体血清或FBS+培养基,PBS也可以,但只能维持渗透压。)
$ w1 P: S+ D) G# z, R4.运送时注意事项:装有细胞容器需要在运送箱内固定;运送人员要注意提的时候保持平稳,不要剧烈晃动(如果提着箱子开心的蹦蹦跳跳的,一会就都被摇死了);运送人员没事别随便打开看(放箱子里呢,放心,跑不掉的);安检别过射线,请工作人员手工检查,等等(不全面,请大家补充)
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9楼
发表于 2015-8-10 13:18 |只看该作者
回复 免疫与细胞 的帖子; q; y: d" I  ?& O( Q

* b8 V  B; C2 d7 `9 u: E7 b谢谢。

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10楼
发表于 2015-8-10 14:13 |只看该作者
回复 momoenn 的帖子% @9 B: b% b& N% W+ |
  E! H' w  b$ g: k
你们做临床,还是做研究?
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