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hmsc状态越来越差,今天测了完培ph竟然8点多,不在各位战友我该怎么调整? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-8-22 12:29 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
网上查了干细胞需稍酸性的培养基,今天就测了下,发现高了不是一点点,之前配了很多完培,不知道怎么处理。我的基培是hyclone的低糖,血清是gibco的141。不知道是不是培养基买了就有问题。
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沙发
发表于 2015-8-22 13:39 |只看该作者
求文献分享,为什么需要弱酸性环境,谢谢

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藤椅
发表于 2015-8-22 16:21 |只看该作者
pH有严格要求吗?我们培养并没有啊?DMEM用的是Gibco的Knockout DMEM而已呀!
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板凳
发表于 2015-8-23 08:07 |只看该作者
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是不是培养箱的气阀或者参数设定有问题......请工程师校准一下吧。
4 S5 U7 [6 _2 l1 E7 F9 \% E" I* d土一点的做法是“放一小瓶培养基在箱子里,每天看看,只要颜色正常就算是OK”8 z6 S" Y5 h+ j; X4 S8 \
7 N; a+ y6 w3 q  k$ G/ d
嗯....考虑下传代时“消化”的过程有没有不适当的操作哩?时间控制,力度,酶浓度神马的~
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报纸
发表于 2015-8-24 08:43 |只看该作者
本帖最后由 qiqishichaoren 于 2015-8-24 08:48 编辑
7 \" z  {0 S$ B2 F( i, w
; Z; C& v' x+ F8 @/ ^8 i一般培养基正常配制是不需要调整PH的。要是你觉得是PH问题,可以用有透气盖的瓶子装培养基,培养环境很酸,看能不能调整过来。
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地板
发表于 2015-8-24 09:38 |只看该作者
我们也是用hyclone的基础培养液,血清也是gibco的。gibco的血清应该是相对不错的,我们用这两个没有出现过什么问题,倒是有一次忘了是什么血清,里面出现过黑胶虫,刚开始影响不大,后来就状态越来越不好。我看你的背景也不是很干净,有黑色的小点,是不是也要考虑一下有没有染菌什么的~~除了培养基影响的还有可能培养的环境,培养箱有没有问题啊,还有就是为什么要偏酸性呢?这个搞不懂。
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发表于 2015-8-24 10:42 |只看该作者
可能是细胞因子(添加物)的问题,基础培养基和血清一般不会有问题,与酸碱度关系不密切。建议重新消化后传代到新的皿或瓶子里,重新添加培养基、添加物和血清。
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发表于 2015-8-24 10:43 |只看该作者
也要考虑支原体污染,一般支原体污染后细胞就会越养越差。
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发表于 2015-8-24 11:32 |只看该作者
开始分化了
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发表于 2015-8-25 16:41 |只看该作者
你配的培养基PH有多少?
) [: ]) p, \! J! |5 G是一瓶有问题还是好几瓶都PH高?你的培养基有酚红吗?
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