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脐血间充质干细胞原代换液问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-9-9 10:35 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我的原代脐血间充质干细胞原代第7天换液的时候,用PBS洗两次,感觉把很多已经贴壁的梭形细胞都洗掉了,可能的原因是什么呢,怎么解决啊,请大家给点意见。。。。。。
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沙发
发表于 2015-9-9 11:12 |只看该作者
回复 ych123 的帖子6 _$ h4 Z8 y% U% ^& T7 W" \0 ?
' ~$ h) t$ n8 S; g) b) m  p6 x
这个可能是你洗的时候太激烈了点啦,其实可以不用洗的,只要吸掉组织和培养基,然后加入新的培养基就可以了,因为在细胞长满的过程中还是要换液几次的,自然就可以清除掉杂的血液细胞的。当然,对于脐带血中分离间充质来讲的话,会有些贴壁的DC或者其他的颗粒细胞什么的,容易被洗下来的。只要贴壁的细胞能够增殖,长满就OK啦
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藤椅
发表于 2015-9-9 14:00 |只看该作者
回复 pengxuleo 的帖子
8 ^2 C" V6 P8 j) D# G/ O/ }6 s" E8 k
, e! ~; m4 ]! C1 w2 o如果不洗的话里面会有很多漂着的血细胞,会影响其他贴壁细胞的生长的
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板凳
发表于 2015-9-9 16:21 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 ych123 的帖子
9 b- u' f, O# f4 U, Z+ y1 Z" U+ q& \$ H# S9 C# y+ ~3 ]; F& V1 H5 ~3 O
如果洗的时候已经做到轻缓不激烈,还是有洗掉的细胞,那没有关系,轻易飘浮起来的细胞其贴壁状态也一定不好,只要剩下的细胞能够正常生长,长满就可以了。
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报纸
发表于 2015-9-9 18:46 |只看该作者
不要清洗,你就把废液全部吸掉,然后添加新鲜的培养液继续培养。直至长满~不适合在脐血培养液中生长的细胞会被逐渐淘汰而死掉!
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地板
发表于 2015-9-10 08:28 |只看该作者
回复 ych123 的帖子
. q6 [" `, w+ o: h  Z2 l2 `& b
: U  T9 x# S% f& b1 v. z' D: k8 Q1 \不会的。如果不是很放心的话,可以准备2瓶细胞,对比进行一下。差别不大的~
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发表于 2015-9-10 08:42 |只看该作者
建议不清洗,只是换液,这样既能除掉血细胞也不会造成贴壁细胞脱落,在后期培养过程,优胜劣汰,自然会淘汰掉不是所需的细胞
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发表于 2015-9-10 09:00 |只看该作者
直接吸弃原来的培养基,然后直接补加新的培养基就可以了,不必用PBS洗。
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发表于 2015-9-10 09:43 |只看该作者
估计是洗的时候力度过大把细胞冲下来了
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发表于 2015-9-10 11:17 |只看该作者
回复 tingting2113 的帖子
7 a9 F5 v# h/ K5 e0 A' `  J
9 O( a$ J! H( V4 ?% S5 e1 b  F$ F好的,谢谢
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