脐带间充质干细胞分离培养

ywx6302706008

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7 D4 K# O8 O- j; g4 \% O我也在养脐带间充质，0.1%胶原酶和透明质酸酶消化法，消化3～4小时，，培养三四天后，很少有细胞贴壁，就算有零星几个，也不是那种细条状的，而是五花八门的形状，状态也很差，有黑点点，感觉基本活不了，不知道您是否用过酶消化的方式养脐带。还有就是以你这么多年的经验来讲，您觉得组织块法比较好还是酶消化法好

ywx6302706008

回复 20062926 的帖子- d; j0 s/ d+ N' P+ B! g6 e4 t% i
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您好，可否问一下您是哪家脐血库的呢，我有个同事是上海脐血库的，他们用的是酶消化法。虽然说酶消化法时间短，只是细胞出来的时间比较短吧，但细胞状态很差，以后贴壁增殖都挺困难的，最后获得相同细胞的所需时间不一定短吧，我个人觉得是这样，您觉得呢。

ywx6302706008

回复 20062926 的帖子6 u# u0 p5 X5 K) B: Q3 e- S+ d
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我今天第一次做组织块的方法，想请问一下就是组织块法的话，脐带组织要剪得很碎吗，我今天把他都剪得跟小米粥一样，稀巴烂，发现铺板的时候很难铺，因为太小了，只能靠镊子拨开来铺板，完全不像有些文献上说的什么每隔5毫米放一块，那种每隔几毫米放一块的话应该是适合于那种剪得不是很碎，还保留块状的情况吧？还有就是我今天一根脐带剪成肉泥后大概有50mL的样子，我今天铺了8个10cm的培养皿，也就是220个平方厘米，感觉好密好密呀，跟肉饼一样，不知道细胞能不能爬出来，以您的经验来看，这么多肉泥要铺到多少面积比较合适呀？您在实际操作过程中会剪得很碎还是会保留块状呢，谢谢，还请赐教