今天做的茜素红染色，大家看看是不是钙化结节，感觉不大像，我的是MC3T3细胞

梦月寒

如附件图。请问这是不是，感觉不是橙红是玫红色

细胞海洋

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/ P9 w( t2 z6 k$ _  W建议你发新帖提问

ymx6800

新手求教，我也是正准备用MC3T3细胞做成骨的诱导分化，我养的细胞通常2-3天就已经长满了，开始诱导之后，细胞长满了要传代么？请各位大神不吝赐教，小妹感激不尽！

ymx6800

新手求教，我也是正准备用MC3T3细胞做成骨的诱导分化，我养的细胞通常2-3天就已经长满了，开始诱导之后，细胞长满了要传代么？请各位大神不吝赐教，小妹感激不尽！

zhen022

图片基底为啥是红色，不是用相差显微镜拍的么？

sysuhoo

是的，量多少确实没有太大关系，反正只是相对定量，以能全部溶解而不溢出为最好，一般24孔板，200ul-400ul都可以接受。

梦月寒

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# O) m. I5 Z6 Z( a& L' O) [6 w$ o" k; Q; w9 R! X
我看有人说波长是562nm的，十六烷基，24孔板每孔加多少比较好？

sysuhoo

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+ R# G$ C' y( S% z钙化结节染色与定量
5 T6 c- j& ^( `$ O) L1) 茜素红染色液配制：称取14.41g茜素红溶解于100ml去离子水中，充分搅拌混匀后，将PH调整为4.1，过滤备用。
% ]3 Z" A0 i  P$ h2) 十六烷基吡啶溶液配制：称取1g十六烷基吡啶溶解于10ml 的磷酸钠溶液中,混匀后调PH=7.0。
  C% L8 i2 I5 ?, `; Y3) 将成骨诱导了21d的细胞样本，PBS轻轻冲洗3遍后，10%多聚甲醛固定1h，再用PBS清洗2遍，茜素红染液染色15min,洗净染色液，相差显微镜照相。钙化结节定量时，将10%十六烷基吡啶溶液加入已染上色的钙化结节样本中15min，收集溶解液，酶标仪检测溶解液的OD值（波长540nm）

梦月寒

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, v. ]; q; |% f/ }, Q- N
9 X9 T3 B  p) v" p8 o8 l% F多谢回复，在请问，我在24孔板做的染色，测OD是否可以直接吸出溶液于96孔板测量。步骤能具体点吗？有点看不懂，后面还要加茜素红？我已经染好色了怎么处理？谢谢

sysuhoo

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% `) Q, d/ e: V- v. F7 A' d0 k( _" f1 l
你用十六烷基吡啶溶解后测OD值就知道了，0.5% 茜素红 pH4.00 ^8 y' `9 ?! I, O8 m0 }
氯化十二烷基吡啶 100mM 室温1小时 562nm吸光度值~