求各位高手指点一般要贴壁多长时间才能获得更多的贴壁细胞

彩虹的微笑

+ J2 }& l/ [0 Z+ \( P* ?8 L2 j' c7 r- L
脐血单核细胞分离后要贴壁诱导培养DC细胞，一般要贴壁多长时间才能获得更多的铁壁细胞，贴壁时需要加细胞因子吗？

本心

要加的IL-4，GM-csf

Michael_HT

脐血分离得到单个核细胞后用常规培养液悬浮置培养瓶放到培养箱培养2h，然后取出悬浮细胞，剩下贴在培养瓶上的就是贴壁细胞。养DC细胞的话加DC培养液和细胞因子IL-4、GM-CSF

吕小松

不加血浆，血浆会阻止贴壁，血浆越少贴壁越多

chimo100

一般贴壁2h即可。在这2h内不要加因子。

zmfang555

3 F* d. M* P) z# @. F/ X/ C

  |: C, w; O* F6 r6 R$ @7 J我一般贴壁1h到1.5h，跟时间关系不是很大，贴壁细胞数量主要和血液质量以及接种细胞密度有关，密度不宜太大，因为分离的PBMC杂质很多，贴壁密度太大的话会影响贴壁率。贴壁时什么也不用加，加了反而会影响贴壁。