脐带组织贴壁法

王苍金

大家好，原代组织块养到皿里多长时间换液呢，是半量换还是全量换呢，网上有说静止7天不要动，糊涂了。求教。

晗晗

隔天全换就可以啦，不过换液的时候千万不要把组织块弄掉啊，一般7~10天吧才能有细胞爬出，耐心等待吧

zhang861006

根据个人习惯和经验，每个人的方法都不一样，绝对静止也没必要，但组织块贴牢一点，相对会好一点。我的方法是剥胶分离原代组织块后，略略加入培养液，浸透组织块，然后不倒置，培养箱培养过夜后，缓慢补加常量培养液，4天半量换液，第七天一般可见细胞爬出，再次换液，一般第十天可以传代。

小猪32

回复 王苍金 的帖子; I7 V( a* i5 X& b. g2 J+ X( B( }8 \2 n

9 h4 r5 ?( n$ a( x6 G+ u" w你可以直接获得华通氏胶后，悬浮培养，这样就不需要顾虑组织块是否漂浮了

zmfang555

原代培养对培养基消耗不大,最重要的是贴壁,细胞本来贴壁不牢,换培养基容易把细胞弄起来,所以最好还是等贴牢以后再换液不迟.

tingting2113

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对于组织块贴壁法，也有不同的方式，一般3—4天话就行，我们实验室会采用半量换液，原因是1、节省培养液。2、保留部分原培养液，给组织块提供更充足养分的同时，使组织块更好的适应环境。反正就这个意思吧，便于细胞爬出。; |1 R6 ~9 [" ]; J  I1 ^% m8 r! i9 f
静止7天是不想把已经贴壁的组织块振动下来，个人觉得没关系，只要轻拿轻放还是可以的，即使被振动下来，也会很快在别的位置贴壁的。一般7-10天，会有细胞爬出的。

jddakui

对于首次摸索条件情况下，最好接种几瓶或皿，选取其中一个做好标记，用来鉴定细胞状态的，一般3天或5天可以观察是否有细胞爬出，最好看见细胞爬出再加液，多总结几次，以后就可以根据自己实验条件进行加液， 换液或者传代处理了

saliai2016

在有细胞爬出前可以不换液，补液就可以了

suruyu

我们是静置培养7天，再补液，没有换过液，一般10-15天左右会有克隆爬出。

happy_noel

一般6-7天全量换液一次。以后可以根据培养液颜色3-4天全量换液。第一次换液前尽量不要动平皿，主要是怕贴块从平皿底部脱落。其实即使脱落的组织块不要弃掉，也是能爬出细胞的。