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标题: HepG2细胞复苏总是失败的经验教训 [打印本页]

作者: sannia 时间: 2011-3-11 16:47 标题: HepG2细胞复苏总是失败的经验教训

做了多次HepG2的细胞复苏，刚开始两次都没有问题，复苏成功。$ p( B# z6 p6 q4 M
最近好几次全都失败，细胞总是不贴壁，第二天99%都浮起来了。+ ^1 i, _3 l6 n' l8 ^) M- f
百思不得其解，密度（10000/cm2据说最合适），培养液，温度等等都试过还是不行。, x4 D, L( l) d0 k3 [* p$ [
昨天教一个同事一起看时，终于发现了一个最愚蠢的错误。
我用的是 corning ultra-low attachment surface!. \: a- C& [/ [% c
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ultra-low啊同志们哪！ultra-low！: `9 O5 `: g* z

转行过来就是有些常识性的问题不知道，痛苦ing！
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3 w. y1 l- N" E" P: i
然后我们把仅存的细胞消化下来铺到12孔版上，今天他们贴壁了。
接下来我想检测一下这些还能不能用，不知道如何检测hepG2进行性退化，哎。

作者: fendou9 时间: 2011-3-11 20:20

哈哈楼主厉害

作者: runsong 时间: 2011-3-13 22:40

天啊，我发现你肯定是养细胞的新手，而且观察力、理化基础知识都有待提高啊。1 L" H# R# r2 ~4 [
两种皿的包装是截然不同的。你把细胞悬液加进皿里时难道就没注意到培养液就像荷叶上的水珠一样咕噜噜乱转。这是因为塑料是疏水性的，就像你用的不贴壁皿，而细胞培养皿是经过射线照射过的，改变了塑料表面的电荷，变得亲水了。. i5 k: i9 t8 S

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