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标题:
求卵巢颗粒细胞生物学特性
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作者:
lianzhimin
时间:
2011-5-30 22:19
标题:
求卵巢颗粒细胞生物学特性
小的想培养一些颗粒细胞,但是小鼠的卵泡太小,在体视镜下做了一次穿刺法取颗粒细胞,像伸长脖子的鸭一样在镜下花了一个小时刺穿卵泡,结果卵巢面目全非,香消玉损,而我的鸭脖脑袋已经变成刚探头的乌龟样,颈项僵硬,两眼无神,一脸无奈与失落,哎!什么也没得到。自知是自己技术问题,但还是想问问有没有其他分离方法?比如通过消化贴壁差速,或者传代消化差时的方法等。求各路英雄好汉指教一二!!!
作者:
aulenuyah
时间:
2011-5-30 23:19
你可以这样:取小鼠的卵母细胞会吗??就是从小鼠输卵管的壶腹部取小鼠的卵母细胞,在输卵管液里成熟培养,等颗粒细胞扩散后,吹打均匀,吸取悬液,接种就可以了。
Z. X. ^9 X: \1 h
不过事先提醒你一下哦,颗粒细胞培养的时候很容易发生老化,要想办法克服哦,呵呵
作者:
xiangchou812
时间:
2011-5-31 09:45
你刺破卵泡后用PBS洗一下,液体里肯定会有不少卵丘卵母细胞复合体(COCs),离心收集后用透明质酸酶消化一下再培养
作者:
鹤顶宏
时间:
2011-5-31 16:00
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aulenuyah
的帖子
+ }+ {% C$ b/ b, S
0 E, |2 M# J4 D; }1 G
不知个老化问题如何克服呢
作者:
lianzhimin
时间:
2011-5-31 20:44
多谢诸位好汉出手相助,小的这就速速去办!
作者:
aulenuyah
时间:
2011-5-31 23:04
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鹤顶宏
的帖子
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* v9 a! j; S, R; E; H" g
这个还真不好说,要手感的,语言无法形容,呵呵。少折腾细胞吧
作者:
moluxingke
时间:
2011-6-1 17:04
你对需要的颗粒细胞有什么要求吗?卵巢是比较小,如果要求不是非常严格的话,可以对小鼠先进行激素处理,如对21d左右的雌鼠注射PMSG 46-48h后再取出小鼠卵巢,这时候许多卵泡变的非常大,在镜下刺起来就比较容易一些,然后挑选那些带颗粒细胞的卵母细胞,可以酶消化处理,也可培养一段时间,然后用枪头吹打,颗粒细胞就会被吹散,你除去卵母细胞,剩下的就是颗粒细胞了,严格来说大多是卵丘颗粒细胞。
作者:
lianzhimin
时间:
2011-6-2 22:53
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moluxingke
的帖子
2 l& E6 ?# `; h f# A1 \0 c
8 _7 }! m1 X7 k% J
我想拿颗粒细胞和胚胎干细胞共培养,看诱导效果。你说的方法我在外文的一篇文献中见过,可行性差,细胞和我都快被折腾死了,收到的量少,且易污染,有没有不刺穿的方法分离?
8 {3 A) j! t }; r l* Y* t
作者:
细胞海洋
时间:
2011-6-3 06:55
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lianzhimin
的帖子
4 s, \) l3 |; O5 a- R" N' |
' s9 f z; S7 n4 B) t2 q) D
建议你发新帖提问
作者:
moluxingke
时间:
2011-6-3 11:51
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lianzhimin
的帖子
/ c: j7 _% B0 p' P# @. @. l
: H, ]9 J2 _& x4 h9 V5 R6 G
嗯 这个我还不太了解,不好意思。
1 d; n/ ~$ B, u9 J' r9 C
如果不穿刺,我觉得很容易有其他细胞污染,毕竟卵巢里面还有膜细胞、基质细胞、表皮细胞等成分。如果是细胞死亡的太多,你可以在培养基里面穿刺然后收集,如果比较熟练的话速度够快,应该没有问题的。
作者:
lianzhimin
时间:
2011-6-3 22:42
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moluxingke
的帖子
' E6 i& n4 \7 e0 C3 L' ~% s
n0 \4 I$ D- K$ u% U9 b
多谢哥哥相助!
作者:
yangpan521
时间:
2011-9-1 08:48
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lianzhimin
的帖子
% y0 \2 m5 p( M' Y
) \( p L. ]) k* P
请问你是在做干细胞诱导卵分化吗?
作者:
yangpan521
时间:
2011-9-2 13:08
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lianzhimin
的帖子
: ^, a& h/ K* h* H& g
: S1 n9 K) N+ C1 A
你好,你是在做分化吗?请问你说的卵丘细胞与干细胞共培养是怎样操作的?
作者:
monk125
时间:
2014-7-30 16:03
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